基于分子印迹技术提取光皮木瓜中的齐墩果酸

摘要

光皮木瓜是一种集观赏、闻香、食用和药用为一体的果品，因其含有齐墩果酸等功能成分，在功能食品开发及综合利用方面越来越受到人们的重视。深入研究光皮木瓜中齐墩果酸的提取及纯化方法，可为光皮木瓜的深加工开发利用及产业增值增效提供一个新的思路与途径。本研究立足我国丰富的光皮木瓜资源，采用分子印迹技术，结合高效液相色谱法，研究制备了齐墩果酸分子印迹聚合物，利用酶法提取光皮木瓜中的齐墩果酸，并用齐墩果酸分子印迹聚合物对提取物进行固相萃取分离纯化，达到提高齐墩果酸得率和纯度的目的。主要研究结果如下:
　　1.齐墩果酸分子印迹聚合物以苯乙烯、二乙烯苯为交联剂，2-丁烯酸为功能单体，过硫酸钠为引发剂。最佳合成条件是:齐墩果酸∶2-丁烯酸∶交联剂为1∶3∶8;苯乙烯∶二乙烯基苯为2∶1;过硫酸钠用量为4％;合成温度为85℃;合成时间为30小时;10％乙酸-甲醇溶液为最佳配比洗脱液。
　　2.齐墩果酸分子印迹聚合物平衡结合试验和吸附动力学试验表明:印迹聚合物比非印迹聚合物对齐墩果酸具有更好的吸附效果。特异性吸附实验中，齐墩果酸分子印迹聚合物对0.05 mg/mL齐墩果酸和熊果酸等浓度混合液中齐墩果酸的吸附量为0.98 mg/g，对熊果酸的吸附量为0.19 mg/g，说明分子印迹聚合物对齐墩果酸具有特异性吸附能力。
　　3.通过单因素和正交试验得出酶法提取光皮木瓜中齐墩果酸的最佳条件是:酶解温度为50℃，酶解pH为5.0，酶解时间为2h，酶液添加量为0.3％。在该条件下，齐墩果酸得率为3.7 mg/g。
　　4.利用30 mL分子印迹固相萃取柱对光皮木瓜粗提液中的齐墩果酸进行纯化最佳淋洗液为8％乙酸-甲醇溶液，淋洗液体积8 mL;最佳洗脱液为10％乙酸-甲醇溶液，洗脱液体积10 mL;纯化后齐墩果酸纯度为89.45％。

目录

声明

符号说明

摘要

1 引言

1．1 木瓜属果实研究进展

1．1．1 木瓜植物资源概况

1．1．2 光皮木瓜中的有效成分

1．1．3 木瓜的应用

1．2 齐墩果酸简介

1．2．1 齐墩果酸性质和结构

1．2．2 齐墩果酸的提取方法

1．3 分子印迹技术

1．3．1 分子印迹技术的概念和原理

1．3．2 分子印迹技术的特点及制备方法

1．4 研究目的与意义

1．5 研究内容与技术路线

1．5．1 研究内容

1．5．2 技术路线

2 材料与方法

2．1 主要试剂及仪器设备

2．1．1 材料选择及处理

2．1．2 主要仪器

2．1．3 主要试剂

2．2 实验方法

2．2．1 齐墩果酸分子印迹聚合物的合成及模板分子的洗脱

2．2．2 非印迹聚合物(NIP)的制备

2．2．3 齐墩果酸分子印迹聚合物的表征

2．2．4 酶法提取光皮木瓜中的齐墩果酸

2．2．5 齐墩果酸分子印迹聚合物对齐墩果酸粗提液的纯化

2．2．6 数据处理

3 结果与分析

3．1 齐墩果酸分子印迹聚合物的合成

3．1．1 功能单体与模板分子配比的确定

3．1．2 功能单体与交联剂配比的确定

3．1．3 聚合温度、聚合时间的确定

3．1．4 引发剂用量的确定

3．1．5 洗脱液的确定

3．2 齐墩果酸分子印迹聚合物的表征

3．2．1 分子印迹聚合物平衡结合实验

3．2．2 分子印迹聚合物的吸附动力学

3．2．3 分子印迹聚合物对齐墩果酸的特异性吸附

3．3 酶法提取光皮木瓜中的齐墩果酸

3．3．1 单因素实验

3．3．2 正交实验

3．4 分子印迹固相萃取纯化齐墩果酸

3．4．1 固相萃取淋洗液体积分数的确定

3．4．2 固相萃取淋洗液用量的确定

3．4．3 洗脱液体积的确定

3．4．4 分子印迹固相萃取对粗提液中齐墩果酸的纯化效果

4 讨论

4．1 关于光皮木瓜资源利用

4．2 关于齐墩果酸的分离纯化

4．3 关于分子印迹技术本体聚合法

5 结论

参考文献

致谢