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鲁中南地区规模化羊场流行病学调查和溶血性曼氏杆菌灭活苗的研制

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1.引言

1.1我国规模化羊场的发展情况

1.2 规模化羊场多重感染简介

1.3 松花粉多糖研究进展

1.4本研究的目的意义

2. 材料与方法

2.1 试验材料

2.2 试验方法

2.3规模化羊场细菌性病原16SrRNA基因序列的测定

2.4疫苗制备

3.结果与分析

3.1.流行病学调查结果

3.2规模化羊场细菌性病原的分离鉴定

3.3主要病原菌16SrRNA基因序列的测定

3.4疫苗制备

4. 讨论

4.1规模化羊场疫病流行病学调查

4.2规模化羊场病原的分离鉴定结果

4.3 以松花粉多糖作为佐剂的溶血性曼氏杆菌灭活苗免疫效果良好

5.结论

参考文献

致谢

论文发表情况

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摘要

近几年来,羊肉价格持续攀升,激发了人们的养羊热情,农区养羊户和羊场不断增多,羊场规模也不断增大。但是,羊场的管理水平和疫病防控意识相对滞后,加上羊只买卖交易频率增大,疫病的威胁也越来越大,部分羊场的疫病始终难以得到有效控制。
  2014年,在枣庄市山亭区、市中区、峄城区、滕州市以及莱芜市等鲁中南地区的多个规模化羊场出现以呼吸道症状为主的传染性疫病,给养羊户带来很大的经济损失。此次疫病发病急促,死亡率高,伴有体温升高、呼吸困难等症状,剖检肺部有明显的病变,但致病原因不详。为探明病原,寻找科学合理的防治措施进行了本研究。
  本研究对多个规模化羊场进行了流行病学调查,分析了疫病流行的基本规律。对采集的75头份典型病料进行了实验室检测,从中分离出4种主要病原菌,通过分离培养、菌落染色观察、染色镜检、初步确定了主要的致病菌为链球菌、葡萄球菌、大肠杆菌和溶血性曼氏杆菌。对4种病原菌进行了生化试验、药敏试验、小鼠功毒试验以及细菌的16SrRNA序列测定等试验,通过实验结果的分析,再次确认了4致病菌,其中溶血性曼氏杆菌的致病性和致死性最强。
  为了找到有效的防控措施,在对发病规律、可能的致病因子分析等基础上,结合本实验室的研究进展及成果,尝试研制泰山松花粉多糖作为佐剂的灭活苗和白油为佐剂灭活苗。通过疫苗的安全性试验,动物保护性试验以及血清中抗体效价水平、白介素-4、CD4+、CD8+等的检测,结果发现:泰山松花粉多糖佐剂灭活苗和白油灭活苗均有一定的免疫原性及免疫保护力。其中,泰山松花粉多糖佐剂疫苗免疫效果更好,对小鼠的保护率可达到70%,更适于临床疫病的防治。

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