芦荟多糖和植物乳杆菌对鸡群生长及免疫性能的影响

摘要

芦荟属于多年生常绿草本植物，在我国南方地区广泛种植，芦荟多糖作为芦荟叶片主要成分之一，具有抗炎、抗氧化、抗病毒等多种生物学活性。研究表明，芦荟多糖能够抑制肠道内有害病原体的生长而不抑制肠道中大多数正常的固有益生菌，从而稳定肠道微生态菌群的平衡。另一方面，家禽饲料中添加益生菌可提高饲料转化率并促进家禽体重增加，乳酸菌是畜牧业中最常用的菌种之一。植物乳杆菌是乳酸菌（LAB）的一种，可增强动物机体免疫力，防止病原菌的入侵。近年来随着抗生素生长促进剂的广泛使用，动物饲料中抗生素残留日益严重，因此，使用其他饲料添加剂替代抗生素生长促进剂成为近年来研究热点之一，本研究从体内和体外两个角度对芦荟多糖与植物乳杆菌这一合剂的益生效果作出评价，以期为畜牧业的健康发展寻找新的路径。 本研究首先对芦荟多糖与植物乳杆菌体外益生效果进行评价。将芦荟多糖用MRS肉汤倍比稀释成不同浓度梯度并加入相同数量的植物乳杆菌，并以黄芪多糖和植物乳杆菌作为阳性对照，探究芦荟多糖对植物乳杆菌的增殖作用。随后我们探究芦荟多糖和植物乳杆菌的耐酸耐胆盐特性及抗病原菌特性，模拟人工胃液、人工肠液观察其耐受程度。结果显示，当芦荟多糖浓度为60mg/mL时，植物乳杆菌数量显著增加，在pH=5、胆盐浓度为0.1%的培养基中能正常生长，在人工胃、肠液中培养1h活菌数无显著变化，培养2h后约下降7%，且抗病原菌效果优于黄芪多糖。因此，体外结果表明芦荟多糖与植物乳杆菌和有良好的益生效果，可进一步在动物日粮中添加并探讨其应用效果。 随后验证了芦荟多糖与植物乳杆菌和对鸡群生长性能及免疫性能的影响。将1日龄SPF鸡240只，随机分为6组，分别为Ⅰ组（芦荟多糖组）、Ⅱ组（黄芪多糖组）、Ⅲ组（芦荟多糖和植物乳杆菌组）、IV组（黄芪多糖和植物乳杆菌组）、Ⅴ组（植物乳杆菌组）、VI组（空白对照组），探究芦荟多糖与植物乳杆菌和对鸡生长性能及免疫性能的影响。研究发现，在芦荟多糖中添加植物乳杆菌，鸡群日增重显著提高，表明芦荟多糖和植物乳杆菌对鸡生长性能有促进作用；通过平板计数统计鸡肠道内大肠杆菌的数量、间接ELISA法测定小肠中sIg A的含量，结果表明芦荟多糖和植物乳杆菌可有效减少有害菌群的数量，保护小肠粘膜屏障；鸡群免疫器官指数显著升高，血清中γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素2(IL-2)和白细胞介素4(IL-4)、T淋巴细胞的转化率显著提高。试验表明芦荟多糖与植物乳杆菌和对鸡具有免疫增强作用；此外，用新城疫N79疫苗对试验动物进行滴鼻免疫并测定抗体效价，结果表明芦荟多糖和植物乳杆菌可显著提高新城疫N79疫苗的免疫效果。因此，芦荟多糖和植物乳杆菌可协同促进鸡生长性能和免疫性能，以期为新型生长促进剂的开发提供新的路径。

目录

声明

符号说明

1 前言

1.1 益生菌的研究现状

1.1.1 益生菌的定义

1.1.2 益生菌的分类

1.1.3 益生菌的作用机制

1.1.4 益生菌的作用

1.1.5 植物乳杆菌及其在家禽中的作用

1.2 植物多糖的研究进展

1.2.1 植物多糖的生物学特性

1.2.2 植物多糖的作用

1.2.3 芦荟多糖的生物学特性及作用机理

1.2.4 芦荟多糖在家禽中的作用

1.3 益生菌与多糖的协同作用研究

1.3.1 益生菌与多糖的研究进展

1.3.2 益生菌和多糖的协同作用

1.4 研究的目的和意义

2 材料与方法

2.1试验材料

2.1.1 菌（毒）株、试验动物与疫苗

2.1.2 试剂和仪器

2.1.3 培养基及试剂的配制

2.1.4 菌株复苏与纯培养

2.2 芦荟多糖和植物乳杆菌体外效果评价

2.2.1 芦荟多糖添加量体外对植物乳杆菌增殖的计数变化

2.2.2 芦荟多糖含量对菌液生长的影响

2.2.3 芦荟多糖和植物乳杆菌培养物的耐酸耐胆盐特性

2.2.4 芦荟多糖和植物乳杆菌培养物的抗人工胃肠液的耐受性

2.2.5 芦荟多糖和植物乳杆菌培养物的抗病原特性

2.2.6 芦荟多糖和植物乳杆菌微生态制剂的制备

2.3 芦荟多糖和植物乳杆菌对SPF鸡生长性能的影响

2.3.1 芦荟多糖和植物乳杆菌对SPF鸡生长性能的影响

2.3.2 芦荟多糖和植物乳杆菌对SPF鸡体内大肠杆菌数量的影响

2.4 芦荟多糖和植物乳杆菌对SPF鸡的免疫性能的影响

2.4.1 芦荟多糖和植物乳杆菌对SPF鸡免疫器官指数的影响

2.4.2 芦荟多糖和植物乳杆菌对SPF鸡细胞因子的影响

2.4.3 芦荟多糖和植物乳杆菌SPF鸡肠道sIgA的影响

2.4.4 芦荟多糖和植物乳杆菌对SPF鸡细胞免疫的影响

2.5 芦荟多糖和植物乳杆菌对NDV-N79疫苗的免疫增强作用

2.6 试验数据分析

3 结果

3.1 芦荟多糖和植物乳杆菌体外益生效果评价

3.1.1 芦荟多糖添加量体外对植物乳杆菌增殖的计数变化

3.1.2 芦荟多糖含量对菌液生长OD值的检测

3.1.3 芦荟多糖和植物乳杆菌培养物的耐酸耐胆盐特性

3.1.4 芦荟多糖和植物乳杆菌培养物的抗人工胃肠液的耐受性

3.1.5 芦荟多糖和植物乳杆菌培养物的抗病原特性

3.2芦荟多糖和植物乳杆菌对SPF鸡生长性能效果评价

3.2.1 芦荟多糖和植物乳杆菌对SPF鸡生长性能的影响

3.2.2 芦荟多糖和植物乳杆菌对SPF鸡体内大肠杆菌数量的影响

3.2.3 芦荟多糖和植物乳杆菌对SPF鸡免疫器官的影响

3.2.4 芦荟多糖和植物乳杆菌对SPF鸡细胞因子的影响

3.2.5 芦荟多糖和植物乳杆菌对SPF鸡肠道的影响

3.2.6 芦荟多糖和植物乳杆菌对SPF鸡细胞免疫的影响

3.3 芦荟多糖和植物乳杆菌对NDV-N79疫苗的免疫增强作用

4 讨论

5 结论

参考文献

致谢

攻读硕士期间发表论文

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