玉米自交系掖478和TY4幼胚不定芽再生体系的优化

摘要

玉米幼胚是玉米组织培养中最常用的外植体，它被广泛的应用于科研工作中。优化玉米幼胚的组织培养体系，对于构建高效遗传转化体系具有重要意义。组织培养体系的优化可以从培养基的种类、添加的激素种类、添加的激素浓度等因素研究。 优良玉米自交系掖478和TY4的组织培养都表现出愈伤组织诱导容易而绿苗分化较难的特点。在本研究中，首先对两种自交系分别在常用的三种培养基（N6培养基、改良N6培养基、MS培养基）上培养14d后，统计II型愈伤组织诱导率。结果显示，自交系Ye478的最适培养基为N6培养基，自交系TY4的最适培养基为MS培养基。在此基础上，在愈伤组织诱导阶段分别添加不同浓度（0mg·L-1、1mg·L-1、2mg·L-1、3mg·L-1）的外源激素Dicamba，统计胚性愈伤诱导率等性状，以此筛选最适激素浓度。结果显示掖478的最适Dicamba浓度为3mg·L-1，TY4的最适Dicamba浓度为2mg·L-1。在分化阶段对两种自交系分别添加不同浓度（0mg·L-1、3mg·L-1、5mg·L-1、7mg·L-1）的Zeatin外源激素，统计绿苗分化率等性状，以此筛选最适激素浓度。结果显示Zeatin浓度5mg·L-1为自交系掖478分化培养的最适浓度，Zeatin浓度3mg·L-1为自交系TY4分化培养的最适浓度。在培养过程中发现，两种自交系在添加外源激素Zeatin的分化培养基培养与对照培养基培养相比，能够提前两周生长出绿苗植株，缩短了分化出苗的时间。 总之，本研究通过基本培养基比较并对培养过程的外源激素Dicamba和Zeatin的最适浓度进行筛选，优化了玉米自交系掖478和TY4的芽再生体系，这一结果为进一步构建高效遗传转化体系奠定了基础。

目录

声明

缩略词说明

1 前言

1.1植物组织培养

1.1.1植物组织培养的开始

1.1.2植物组织培养的发展

1.1.3植物组织培养的方法与应用

1.2玉米的组织培养

1.2.1玉米愈伤组织分类特征及再生

1.2.2影响玉米组织培养中愈伤组织诱导的因素

1.2.3玉米组织培养中存在的问题及解决办法

1.2.4玉米组织培养中主要的研究性状及展望

1.3本研究的目的与意义

2材料与方法

2.1试验材料

2.1.1培养基

2.1.2生化试剂

2.2试验方法

2.2.1玉米籽粒的消毒和取材实验

2.2.3愈伤组织的诱导

2.2.4愈伤组织的继代与分化

2.3数据分析

3结果与分析

3.1培养基与愈伤组织诱导率的关系

3.2 麦草畏（Dicamba）浓度对愈伤组织诱导的影响

3.2.1 Dicamba与胚性愈伤组织诱导率的关系

3.2.2 Dicamba与胚性愈伤组织诱导率的显著性分析

3.2.3 Dicamba与愈伤组织克隆力的关系

3.2.4 Dicamba与单个愈伤组织平均增重量的关系

3.3 玉米素（Zeatin）浓度对分化培养的影响

3.3.1 Zeatin浓度对绿苗分化率的影响

3.3.2 Zeatin浓度与绿苗分化率的显著性分析

3.3.3 Zeatin浓度对单个愈伤组织出苗数的影响

3.3.4再生绿苗的形态差异

4 讨论

4.1培养基类型对不同自交系组织培养的影响

4.2激素的添加对愈伤组织诱导和分化的影响

4.3不同培养基体系下苗再生效率的提升

4.4本研究中还未解决的问题

5 结论

参考文献

附录

致谢