预防性添加胰蛋白酶抑制剂对大鼠胰岛分离纯化的影响

摘要

目的： 探讨胰蛋白酶抑制剂乌司他丁在大鼠胰岛分离纯化中的作用． 方法： 用含0.5mg/ml胶原酶的Hanks溶液灌注大鼠胰腺。实验组在消化液中添加乌司他丁5000U/ml；对照组：消化液中不含乌司他丁。充分消化后，200目不锈钢网过滤，将胰岛提取物低温离心洗涤2-3次；Ficoll400不连续密度梯度离心纯化。低温离心洗涤2-3次后得到胰岛。光镜观察胰岛形态，以DTZ染色鉴定胰岛并计算纯度(得率)AO-PI染色检测胰岛活性，糖刺激试验判定胰岛功能，将各组分离出的胰岛进行比较。 结果： 实验组得到的胰岛数量是(291.81±25.83)个．对照组为(225.59±20.88)个．加用乌司他丁分离出的胰岛在形态、数量方面均优于对照组(P＜0.01)。实验组在45 mm内每10个胰岛细胞在低糖和高糖刺激下分泌的胰岛素浓度分别为(28.75±2.55)μIU/ml/10 is-let/45 min和(84.50±3.46)μIU/ml/10 islet/45 min，对照组分别为(23.88±2.80)μIU/ml/10 islet/45 min和(78.25±3.85)μIU/ml/10 islet/45 min。在低糖和高糖刺激下，加用乌司他丁组胰岛素的释放量优于对照组(P＜0.01)。 结论： 加用胰蛋白酶抑制剂乌司他丁灌注胰腺对大鼠胰岛分离具有保护作用。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英文缩略语表

声明

前言

1实验材料与方法

2结果

3讨论

4结论

5附图

6参考文献

文献综述 胰岛细胞移植前处理的研究进展

攻读学位期间发表文章情况

个人简历

致谢