CDglyTK双自杀基因治疗C6胶质瘤的实验研究

摘要

该研究将CD-TK融合基因转染C6胶质瘤细胞,进行前体药物治疗的体内、外试验,探讨其对C6胶质瘤的杀伤作用及旁观者效应,以寻求有效的自杀基因治疗方法.结论:携带CD-TK融合基因的逆转录病毒载体成功转入C6胶质瘤细胞,并有效转录和表达,而且不影响细胞的生长特性;TK/GCV体系对细胞有较强的直接杀伤作用,CD/5-FC体系引起较为明显旁观者效应;其作用靶点为DNA合成期既S期,细胞凋亡是引起细胞死亡的主要途径之一;双自杀基因CD-TK/5-FC-GCV治疗具有协同作用,可显著提高自杀基因治疗的疗效,体内、外试验具有相似性,因而具有实际应用价值.

目录

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缩略语表

论文一CDglyTK双自杀基因转染C6胶质瘤细胞及鉴定

前言

材料与方法

一材料

二实验方法

结果

1pWZLneoCDglyTK质粒的转化、扩增、纯化鉴定

2CD-TK基因转染PA317细胞

3逆转录病毒滴度的测定

4携带CD-TK基因的逆转录病毒转染C6胶质瘤细胞

讨论

结论

参考文献

论文二CDglyTK双自杀基因治疗对C6胶质瘤细胞杀伤作用的体外实验研究

前言

材料与方法

一材料

二方法

结果

1.C6细胞和C6/CD-TK细胞的生长曲线及倍增时间

2.GCV、5-FC对C6/CD-TK细胞的杀伤作用

3光镜下观察

4透射电镜下观察

5旁观者效应观察

6免疫组织化学染色结果

讨论

结论

参考文献

论文三双自杀基因治疗对C6胶质瘤细胞杀伤作用的体内实验研究

前言

材料与方法

一材料

二方法

结果

1C6胶质瘤细胞的培养及收集

2质粒DNA制备与鉴定

3C6胶质瘤细胞裸鼠皮下种植及基因转染

4转染细胞鉴定

5载瘤裸鼠分组治疗

6肿瘤组织HE染色

7肿瘤组织免疫组织化学染色

8流式细胞仪检测胶质瘤细胞凋亡

9电镜观察结果

讨论

结论

参考文献

附图

致谢

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