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优化密码提高乳头瘤病毒L1基因蛋白表达和免疫原性的研究

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符号说明

前言

第一部分BPVL1-GFP融合基因真核表达载体的构建以及在哺乳动物细胞中的表达

材料和方法

1.实验材料

2.实验方法

结果

讨论

第二部分以减毒沙门菌为载体L1基因DNA疫苗粘膜免疫效果的研究

材料和方法

结果

讨论

小结

综述 优化密码提高病毒蛋白表达的研究进展

实验图表

参考文献

致谢

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摘要

乳头瘤病毒(Papillomavirus,PV)感染宿主皮肤和粘膜上皮,能引起多种恶性及良性增生.PV主要晚期蛋白L1能诱导宿主产生中和性、针对衣壳蛋白的特异性抗体,是进行预防性免疫的主要靶抗原.在该研究中,我们探讨了优化密码对BPV L1基因蛋白表达和免疫原性的影响,为PV相关疫苗乃至其它病原体有效疫苗的研制进行初步探索.该研究构建野生型和优化密码的人源化牛乳头瘤病毒(BPV)晚期基因L1-GFP融合基因真核表达质粒,通过检测在人角质形成细胞HaCAT等不同哺乳动物细胞中的表达状况,自细胞水平探讨优化密码对晚期基因L1蛋白表达的影响.综上所述,该研究选用人角质形成细胞为主要研究对象,首次探讨了优化密码L1基因在HaCAT细胞中的表达状况,并在几种不同的哺乳动物细胞中较为全面地进行了研究,得到了一致的结论:即优化密码能提高PV L1基因在哺乳动物细胞中的表达水平.同时对优化密码的机制进行了初步探讨,认为在人角质形成细胞中L1蛋白表达水平的提高可能主要是由于翻译的增加所致.通过此项研究,为有效的PVL1预防性疫苗的研制奠定了实验基础及有效的PV L1基因DNA免疫途径的探索提供了实验基础.

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