几丁糖预防兔膝关节粘连的实验研究

摘要

目的：粘连是结缔组织纤维带与相邻的组织或器官结合在一起而形成的异常结构。术后粘连是外科临床上常见的并发症，膝关节粘连导致关节挛缩，运动范围(RangeofMotion，ROM)明显减少。在手术部位放置可降解、吸收的高分子材料，可以保护手术创面，减少出血，抑制瘢痕组织形成，术后防止粘连，减少挛缩。几丁糖溶液是一种具有粘弹性的高分子生物材料，将几丁糖用于膝关节术中，可包饶关节面，来防止术后粘连。本实验设置兔膝关节滑膜切除术模型，术中放置几丁糖以观察其术后预防粘连的效果为目的。 方法：将16只健康，成年的家兔(雌雄不分)随机分为两组，一组为几丁糖组即实验组，和对照组。所有动物在无菌相同的条件下均行右侧膝关节滑膜切除术，并搔剐髌上囊区域，几丁糖组术区(髌上囊区域为主)放置几丁糖注射液，对照组不放，术毕用石膏管型将兔膝关节固定于屈曲位，时间为4周，对左侧膝关节不行任何处理。每组兔子先行膝关节活动角度的测量，为准确地测量固定4周后膝关节的活动角度，采用在恒定伸膝外力作用下测量膝关节活动角度的方法。动物深度麻醉去除管型后，取平卧位，将右大腿固定，膝下10cm处用绷带套住右小腿，另一端系弹簧秤均匀力量(500g)行水平牵引，使膝关节被动伸直方向。先用细克氏针折弯与兔子股骨胫骨纵轴一致，在兔膝关节挛缩和拉伸后各形成一角度，描于纸上，并得到两者的差值，就是膝关节活动角度，这样测三遍，然后用高精确度的测角仪测出每只兔子膝关节活动角度，以其平均值作为结果。然后动物行右膝关节的大体观察，半定量计分，一盲法观察者观测，并作半定量评估。记分标准：无粘连为0分，薄膜样弱粘连为1分，轻度粘连为2分，中度粘连为3分，严重的纤维性粘连为4分。大体观察之后，将测完角度的兔子处死，在髌上囊处取粘连组织，标本烘干，贮存于-20℃冰箱中。胶原中含有12.5％的羟脯氨酸(质量)，故可通过测量粘连组织中羟脯氨酸的含量来折算总胶原含量。先测出标准羟脯氨酸浓度的紫外线吸光度，绘制标准曲线紫外线分光光度仪在560um处测溶液吸光率，再测定样品羟脯氨酸吸光度，得出羟脯氨酸的含量。胶原质量=羟脯氨酸质量×8。接着立即切下带着软组织的右膝关节，在10％福尔马林-10％硝酸混合夜中固定、脱钙1周(大头针可轻松刺入骨组织)，自来水冲洗，取髌上囊周围的粘连组织，经常规处理制成切片，行饱和苦味酸-天狼猩红染色，偏振光显微镜下观察。拍摄照片用LERCAQWinV3软件分析胶原Ⅰ/Ⅲ(面积)。所有数据经过SPSS10.0统计软件包处理，结果用(X)±S表示。检验方法是随机分组设计的两样本均数比较的t检验，以P＜0.05表示差异有统计学意义。 结果：实验组和对照组兔子各有1只死亡，1只实验组兔子因石膏管形出现压迫性溃疡不能使用，除去这3只兔子，留有13只动物作为研究对象。7只对照组动物膝关节被动活动范围较小，而6只实验组兔子膝关节被动活动范围较大。动物生物力学实验结果：对照组：30.29°±5.438°，实验组：44.33°±5.125°。统计学结果，则对照组膝关节孪缩程度高于实验组有显著性差异。大体观察时发现粘连成较厚的纤维粘连组织，而实验粘连教薄弱，对照组盲法半定量评分结果是3.14±0.556分，而实验组是2.16±0.408分。统计学结果，则对照组粘连程度高于实验组有显著性差异。生物化学分析测得羟脯氨酸的质量，然后利用公式羟脯氨酸的质量×8得到胶原的质量，这样1mg干燥粘连组织中的总胶原含量是：对照组134.03±11.68ug，实验组80.06±10.13ug。统计学结果，则对照组粘连组织中的胶原含量高于实验组有显著性差异。粘连组织切片经饱和苦味酸-天狼猩红染色，纤维镜偏光法观察胶原Ⅰ/Ⅲ结果是：对照组1.860±0.115，实验组1.396±0.082。统计学结果，则对照组粘连质量高于实验组有显著性差异。 结论：通过在兔膝关节滑膜切除术放置几丁糖术后及对照组的实验观察、生物力学角度测量、大体观察、生物化学的总胶原含量的测量、偏振光显微镜胶原Ⅰ/Ⅲ的测定结果可以看出，几丁糖组的粘连程度，强度，质量均低于对照组。表明膝关节手术中放置几丁糖可预防术后粘连，有利于功能恢复，提高术后膝关节运动范围。

目录

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摘要

符号说明

前言

材料与方法

结果

讨论

结论

综述用于预防骨科术后粘连材料的研究进展

附图

论文参考文献

综述参考文献

致谢