孕期染毒二月桂酸二丁基锡（DBTD）对子代雄性鼠生殖内分泌系统的影响

摘要

有机锡化合物是一类有着重要工业用途的金属有机化合物，主要用作聚氯乙烯(PVC)稳定剂、防污涂料、杀虫剂和杀菌剂，其中，用作PVC稳定剂的有机锡约占世界有机锡化合物总产量的70﹪。自从三丁基锡(TBT)诱导海洋生物发生性畸变被发现，有机锡污染引起了人类的广泛关注，各国纷纷开展一系列调查研究，并制定相应的法规，限制有机锡的生产和使用。二月桂酸二丁基锡(DBTD)是一种应用较为广泛的稳定剂，主要应用于PVC软质透明制品。虽然DBTD的毒性不如TBT强，但研究表明DBTD对动物的免疫系统，神经系统都有毒害作用。本实验室以往的研究表明，新出生wistar大鼠连续5天腹腔注射DBTD后，血清睾酮在1个月和3个月时都明显升高，并伴有睾丸组织增大，提示DBTD对雄性大鼠的生殖发育有一定的影响。本研究选择孕期染毒DBTD，通过检测子代雄性动物性器官脏器系数、睾丸酶活力、附睾精子数以及激素水平，探讨DBTD的生殖毒性及其内分泌干扰作用。 目的: 通过研究孕期染毒：DBTD的Wistar大鼠的子代雄性鼠性成熟后生殖系统的改变，初步探讨DBTD的生殖毒性及其作用机制，并为控制DBTD的环境污染提供实验和理论依据。 方法: 将Wistar 大鼠以雌：雄为2∶1的比例同笼交配，第2天上午8∶00-9∶00时检查阴道栓，出现阴道栓记为妊娠第O天。将妊娠大鼠随机分为4个剂量组(阴性对照组、10、20、30mg/kgDBTD染毒剂量组)，每组4只。妊娠第12-20天，每天对孕鼠称重，连续灌胃染毒，各剂量组灌胃量均为5ml/kg。孕鼠自由摄食、饮水，每天光照12h，并保持适宜温度、相对湿度。仔鼠出生后第21天断乳，雌雄分笼。第70天每组随机抽取10只动物，称重后断头取血4-5ml，3000g离心10min，收集血清，-20℃保存，用作测定激素；分离双侧睾丸和附睾并称重，计算脏器系数。每组随机抽取两个动物的一侧睾丸，放入预先配制好的中性甲醛固定液中固定，用于制作病理切片；其余睾丸-80℃保存，用作酶活力和睾丸睾酮(T)的测定。附睾-20℃保存，用作附睾精子计数。 结果： 1.DBTD对妊娠大鼠生长状况及产仔情况的影响各剂量组孕鼠活动正常，未观察到明显中毒症状。染毒期间不同染毒剂量组孕鼠体重增加量、产仔数及仔鼠雌、雄比例(x<'2>=1.041，P>0.05)与对照组相比差异均无统计学意义。 2.DBTD对子代雄性鼠生长状况的影响各剂量组子代雄性鼠生长发育均良好，活动无异常现象，未见任何明显中毒症状。各染毒剂量组子代雄性鼠体重与对照组相比差异无统计学意义。 3.DBTD对子代雄性鼠性器官发育及精子数的影响各染毒剂量组睾丸和附睾与对照组相比外观无明显差别，附睾重量、附睾脏器系数与对照组相比差异均无统计学意义。各染毒剂量组睾丸重量、睾丸脏器系数、附睾精子数与对照组相比有增高的趋势，30mg/kg剂量组睾丸重量、睾丸脏器系数与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01，P<0.05)，20mg/kg和30mg/kg剂量组精子数与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05，P<0.01)。 4.DBTD对子代雄性鼠睾丸酶活力的影响各剂量组琥珀酸脱氢酶(SDH)、酸性磷酸酶(ACP)和乳酸脱氢酶(LDH)活力呈现先增高后降低的趋势，10mg/kg和20mg/kg剂量组ACP活力、10mg/kg剂量组LDH活力、30mg/kg剂量组一氧化氮(NO)含量均高于对照组，且差异有统计学意义(P<0.05)：各染毒剂量组一氧化氮合酶(NOS)活力、SDH活力与对照组相比差异无统计学意义。 5.DBTD对子代雄性鼠血清和睾丸组织激素水平的影响各染毒剂量组黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)与对照组相比差异均无统计学意义；30mg/kg剂量组血清T含量明显高于对照组，且差异有统计学意义(P<0.05)；各染毒剂量组睾丸组织中T含量与对照组相比均显著升高，且差异有统计学意义(P<0.05，P<0.05，P<0.01)。6子代雄性鼠睾丸组织的病理改变各染毒剂量组与对照组相比均无明显病理改变。 结论: 妊娠第12-20天对Wistar大鼠连续染毒本实验剂量的DBTD，可干扰子代雄性鼠体内T的合成和代谢，导致睾丸匀浆中T和血清T含量明显增高，进一步促进睾丸增大，精子数增多，但这一过程的调控可能不是通过下丘脑一垂体一睾丸轴来实现的，睾丸酶活力随精子增多出现相应代偿性反应，睾丸组织未见明显病理改变。

目录

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材料与方法

结果

讨论

结论

附录

参考文献

致谢

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