龈沟液中MMPs含量与不同年龄组大鼠正畸牙根吸收的相关性研究

摘要

正畸牙根吸收的发病率高，严重的牙根吸收可引起牙根尖不可复性变短变钝，从而导致牙齿冠根比失调，牙齿松动，甚至脱落。目前对于牙根吸收尚无有效的治疗方法，只能通过早期发现、去除病因，从而防止其进一步发展。而临床上常用的检测牙根吸收的方法是根尖X线片，其存在着不清晰、敏感性差、有辐射等缺点，无法在早期发现牙根吸收。如果能在早期诊断出牙根吸收，那么对于防止其进一步发展、促进其修复具有重要意义。基质金属蛋白酶(MMPs)参与降解包括骨在内的全身各种组织的细胞外基质，有研究表明基质金属蛋白酶是参与牙周组织改建的主要酶类，可能与牙根吸收有关。龈沟液(GCF)是牙龈沟中的渗出液，其成分随着周围组织的变化而改变，其中包括基质金属蛋白酶。由于龈沟液提取方便、无创、快捷，通过检测龈沟液中某些物质的改变来诊断疾病、监测病程、了解治疗效果已被牙周科医师广泛应用。 目的: 本研究首先构建大鼠正畸牙根吸收的动物模型，然后通过测定大鼠牙齿受正畸力后龈沟液中MMP-1和MMP-9的含量变化，观察两者与根吸收的相关性。并观察不同年龄组大鼠牙齿受正畸力后龈沟液中MMP-1和MMP-9的含量变化的差异。从而试着寻找一种可能的与牙根吸收有关的指标，为临床上早期检测正畸牙根吸收提供科学的实验依据。 方法: 选择48只SPF级健康雌性Wistar大鼠作为研究对象，其中6周龄28只，体重(160-180)g；12周龄20只，体重(200-230)g。2％盐酸氯胺酮腹腔注射麻醉后，在大鼠上颌安装正畸加力装置，以大鼠上颌两中切牙为支抗，采用粘接剂联合磨沟固位法，施加50g较大拉力牵引一侧第一磨牙向近中，从而建立大鼠正畸牙根吸收的动物模型，每周加力一次。另一侧作为对照侧，仅在第一磨牙牙颈部用结扎丝环扎。在第1、2、4、7周分别处死2只6周龄大鼠，制作实验牙的组织学切片，观察牙根吸收的发生情况。实验过程中，每周提取其余40只大鼠实验牙及对照牙的龈沟液，并应用SDS-PAGE，Western blot和Gel-Doc凝胶成像系统定量检测龈沟液中MMP-1和MMP-9含量的改变。根据大鼠年龄，将实验动物分为青少年组和成年组。应用SPSSll.0统计软件包对各组大鼠实验侧与对照侧龈沟液中MMP-1和MMP-9含量进行统计分析。 结果: 1.Wistar大鼠的上颌第一磨牙正畸牙根吸收发生于加力后的第2周，病理切片上表现为吸收陷窝的形成，多核巨噬细胞的出现等，且随着加力时间的延长，牙根吸收越来越严重。 2.无论青少年组大鼠还是成年组大鼠、实验侧还是对照侧，实验过程中的GCF量均高于实验前(P<0.05)，实验中各周之间的GCF量差别无统计学意义(P>0.05)；在实验过程中各周，实验侧的GCF量均高于对照侧(P<0.05)；成年组大鼠的GCF量高于青少年组大鼠(P<0.05)。 3.两组大鼠的MMP-1和MMP-9含量在实验侧和对照侧均是自加力第1周开始升高(与0周相比P<0.05)，第2周时含量大幅增多(与第1周相比P<0.001)，至第3周时达高峰，从第4周开始回落，至第7周最低，但仍高于加力前的水平。 4.在实验过程中各周，青少年组和成年组大鼠的MMP-1含量实验侧与对照侧的差异均有统计学意义(P<0.05)，实验侧高于对照侧；两组大鼠的MMP-9含量实验侧与对照侧的差异均无统计学意义(P>0.05)。 5.青少年组大鼠和成年组大鼠龈沟液中MMP.1和MMP一9含量的基础水平(即安装正畸加力装置前的水平)以及在加力第1周时的水平差异无统计学意义(P>0.05)，但成年组比青少年组稍高。成年组大鼠较青少年组大鼠GCF中MMPs含量的变化更为显著。在实验初期，成年组大鼠MMPs含量增长速度快于青少年组；后期，成年组大鼠较青少年组大鼠的MMPs含量下降速度慢。 结论: 1.以大鼠上颌两中切牙为支抗，采用粘结剂联合磨沟固位法，施加50g拉力牵引一侧第一磨牙向近中，可建立科学、简单、可靠的大鼠正畸牙根吸收的动物模型。 2.本研究建立的大鼠正畸牙根吸收模型，从加力第2周起在组织学上就已开始发生牙根吸收。 3.龈沟液中的MMP-1和MMP-9的含量与正畸牙根吸收存在一定关系，MMP-1较MMP-9在反映正畸牙根吸收的发生、发展上可能更敏感。 4.成年大鼠较青少年大鼠的正畸牙根吸收更严重。

目录

论文说明：符号说明

声明

前言

研究一大鼠正畸牙根吸收动物模型的建立

材料与方法

结 果

讨 论

结 论

研究二不同年龄组大鼠正畸牙根吸收龈沟液中MMP-1和MMP-9变化的实验研究

材料与方法

结 果

讨 论

结 论

附 表

附 图

参考文献

致 谢

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