丙戊酸增强人卵巢癌耐药细胞株COC1/DDP对顺铂敏感性的研究

摘要

研究背景、目的：
　　 化疗耐药是目前恶性肿瘤治疗中急需解决的难题。卵巢癌对化疗的耐药性是影响卵巢癌患者五年生存率的一个重要因素。不少逆转剂(如维拉帕米、三苯氧胺等),由于达到逆转作用时所需的剂量对人体产生明显的毒副作用,因此限制了它们的临床应用。国外报道组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histon-deacetylaseinhibitors,HDACIs)具有诱导肿瘤细胞分化、细胞周期阻滞和凋亡,逆转转移性肿瘤的恶性表型,以及增强放化疗敏感性等生物学效应。HDACIs对放化疗增敏作用的机制非常复杂,至今还未完全阐明。丙戊酸(valproic acid,VPA)是临床上被广泛应用的广谱抗癫痫药,最近发现其具有抑制HDAC活性的作用,因其半衰期长、生物利用度高、有效血药浓度低、毒副作用小等优点,而显示出良好的临床应用前景。本研究旨在探讨丙戊酸是否可以增强卵巢癌耐药细胞COCl/DDP对顺铂的敏感性并初步探讨其增敏的可能机制,并为临床用药提供理论指导。
　　 方法
　　 本实验选取人卵巢癌耐药细胞株COCl/DDP作为实验研究对象,采用体外细胞培养的方式,实验时选择处于对数生长期的细胞。设立对照组、单用顺铂组、顺铂与丙戊酸联合组;倒置显微镜下观察细胞形态学变化;以WST-1为指标检测不同药物处理前后人卵巢癌耐药细胞株COCl/DDP的增殖变化情况;流式细胞仪分析不同药物处理前后细胞的凋亡情况;免疫细胞化学分析法分析不同药物处理前后NF-κB P65的表达情况。实验所得数据应用SPSS13.0统计学软件进行统计学处理,P∠0.05为有统计学意义,统计方法使用单因素方差分析和t检验。
　　 结果
　　 不同药物处理人卵巢癌耐药细胞COCl/DDP,倒置显微镜下观察细胞形态学变化:对照组细胞生长状态良好,顺铂组细胞数目减少,胞浆内出现空泡,体积缩小,丙戊酸联合顺铂组细胞数目减少更加明显,视野内可见悬浮团簇状的凋亡细胞;WST-1增殖抑制实验显示:作用24、48、72小时后丙戊酸与顺铂联合用药细胞生长抑制率分别为(73.25±11.39、82.13±0.72、97.77±1.05)％明显强于单用顺铂组(44.76±2.15、71.64±3.98、93.32±1.98)％,两者比较差异有统计学意义(P＜0.05);流式细胞术检测显示丙戊酸与顺铂联合组的凋亡率为(48.50±5.428)％明显高于顺铂单用组凋亡率(23.27±1.93)％,两者比较差异有统计学意义(P＜0.05);免疫细胞化学分析法显示:单用顺铂组NF-κB P65的阳性表达率80％明显高于对照组NF-κB P65的阳性表达率20％,两者比较差异有统计学意义(P＜0.05),表明顺铂可以激活NF-κB,从而产生化疗耐药。丙戊酸与顺铂联合组NF.K B P65的阳性表达率为10％明显低于单用顺铂组NF-κBP65的阳性表达率80％,且两者比较差异有统计学意义(P＜0.05),表明丙戊酸可以抑制NF-κB的激活,一定程度上逆转人卵巢癌耐药细胞COCl/DDP对顺铂的耐药性。
　　 结论
　　 组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊酸可以抑制人卵巢癌耐药细胞株COCl/DDP的增殖,并且可以诱导该肿瘤细胞发生凋亡;丙戊酸在较低浓度即0.25mmol/L时和顺铂联合应用可以增强人卵巢癌耐药细胞株COCl/DDP对顺铂的敏感性;丙戊酸这种对人卵巢癌耐药细胞株COCl/DDP的增敏作用可能与NF-κB激活被抑制有关。

目录

文摘

英文文摘

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前言

材料与方法

结果

讨论

结论

附图

参考文献

综述:丙戊酸抗肿瘤作用研究进展

致谢

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