HLA-DRB1*1501和TNF-a-308位点基因多态性预测再生障碍性贫血免疫抑制疗法疗效的研究

摘要

目的：
　　 研究再生障碍性贫血患者HLA-DRB1*1501表型及肿瘤坏死因子-a(TNF-a)-308位点基因多态性对再生障碍性贫血患者以环孢菌素A(CsA)为主的免疫抑制疗法(IST)的疗效的相关性,研究和分析HLA-DRB1*1501表型与PNF-a-308位点基因多态性联合检测在IST疗效预测中的应用价值。
　　 材料与方法
　　 1、病历资料初诊再生障碍性贫血患者40例,其中男22例,女18例,年龄在11-79岁,中位年龄36岁,重型再障31例,非重型9例,接受以环孢菌素A为主的IST方案治疗,3-6个月判定疗效。
　　 2、应用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性分析(PCR-RFLP)方法分析TNF-α-308G/A多态性。
　　 3、序列特异性引物聚合酶链反应方法(PCR-SSP)方法检测HLA-DRB1*1501表型。
　　 4、随访观察判定疗效,比较不同疗效反应的患者上述指标的差异,分析TNF-α-308G/A多态性与HLA-DRB1*1501联合实验与再障患者IST疗效的关系,评价联合实验在再障患者IST疗效预测中的应用价值。
　　 结果
　　 1、40例从患者中,HLA-DRB1*1501基因型的检出例数为14,该表现型频率为35％(14/40),基因型频率为19.4％.基因型频率和表现型频率均明显高于文献报道的正常人群中该基因型频率和表现型频率。在IST治疗有效和无效的患者中HLA-DRB1*1501的表现型频率分别为为50％和12.5％,基因型频率分别为29.3％和6.46％,两组比较差异有显著性差别。14例HLA-DRB1*1501阳性的患者IST治疗有效12例,有效率85.7％,26例HLA-DRB1*1501阴性患者IST治疗有效12例,有效率46.2％,两者差别有统计学意义。
　　 2、40例从患者中TNF-α308A基因型的检出例数为13,该表现型频率为32.5％(13/40),基因型频率为17.8％,表现型频率和基因型频率均明显高于文献中正常人群中该基因的表现型频率和基因型频率。在IST治疗有效和无效的患者中TNF-α308A的表现型频率分别为45.896和12.5％,基因型频率分别为26.4％和6.46％,两组的差别有统计学意义。13例TNF-α308A阳性的患者IST治疗有效11例,有效率为84.6％,27例TNF-α308A阴性的患者IST治疗有效13例,有效率48.1％,两者差别有统计学意义。
　　 3、logistic回归加ROC曲线分析HLA-DRB1*1501与TNF-α308A(TNF2)联合检测与患者免疫抑制疗法疗效的关系,计算出HLA-DRB1*1501阳性TNF2阳性、HLA-DRB1*1501阳性TNF2阴性、HLA-DRB1*1501阴性TNF2阳性、HLA-DRB1*1501阴性TNF2阴性四种预测概率值分别为0.963、0.785、0.754、0.354。可见HLA-DRB1*1501阳性TNF2阳性、HLA-DRB1*1501阳性TNF2阴性、HLA-DRB1*1501阴性TNF2阳性的预测概率值均大于诊断点(P=0.6778),且双阳性时的预测概率高于HLA-DRB1*l501阳性TNF2阴性、HLA-DRB1*1501阴性TNF2阳性时,提示双阳性时的治疗效果可能要好于HLA-DRB1*1501阳性TNF2阴性和HLA-DRB1*1501阴性TNF2阳性时。双阴性的预测概率值明显小于诊断点,提示在双阴性时患者治疗效果可能不好。
　　 结论
　　 1、本研究对目前具有临床应用潜能的IST疗效预测指标进行了研究和评价,结果证实遗传学指标检测可作为再障患者IST疗效预测的重要方法。
　　 2、HLA-DRB1*1501与TNF-α-308位点多态性联合检测可以作为预测再障患者IST疗效的、具有临床实用价值的一种指标,联合检测能弥补单一指标检测灵敏性差的缺陷。
　　 3、HLA-DRB1*1501阳性TNF2阳性、HLA-DRB1*1501阳性TNF2阴性、HLA-DRB1*1501阴性TNF2阳性的患者都预示对IST治疗有效,但是第一种有效地可能性高于后两者。HLA-DRB1*1501阴性TNF2阴性的患者则提示对IST治疗效果可能不好,可提示临床医生选择其他对患者治疗效果更有效地免疫抑制剂治疗或者其他治疗方式。
　　 4、这两种实验技术条件成熟,方便简单,适合临床快速检验的要求,能帮助临床医生快速地对患者治疗有效地可能性做出初步判断,为临床提供了一种有效且方便的IST疗效预测方法。

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结果

讨论

结论

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参考文献

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