早期胰岛素强化治疗对NOD鼠和T1DM儿童免疫调节和β细胞再生影响

摘要

第一部分
　　 目的：探讨早期胰岛素强化治疗对非肥胖糖尿病(NOD)小鼠T细胞亚群的免疫调节机制。
　　 方法：12～14周龄近期发病NOD小鼠30只随机分为早期强化治疗组(EIT组)、早期常规治疗组(ECT组)、晚期强化治疗组(LIT组)、晚期常规治疗组(LCT组)、糖尿病对照组(DM组)，另选取同周龄未发病雌性NOD小鼠6只为正常对照组(NC组)。比较EIT组与其他各组体质量、24h动态血糖及干预治疗后脾脏和胸腺T细胞亚群的变化情况。
　　 结果：EIT组治疗后体质量高于LIT组、LCT组和DM组(P<0.001)，接近NC组(P>0.05)，24h动态血糖平均值基本维持在(5.758±1.515)mmol/L，低于LIT组、LCT组和DM组(P<0.001)，高于NC组(P<0.05)，诱导脾脏中CD4+、CD3+T细胞百分比低于LCT组和DM组(P<0.001)，并使CD4+/CD8+亚群比值低于LCT组和DM组(P<0.001)，同时诱导胸腺CD4+CD8-单阳性细胞百分比低于LIT组、LCT组和DM组(P<0.001)，CD4+CD8+双阳性细胞百分比与LIT组、LCT组和DM组比较显著升高(P<0.001)，
　　 结论：
　　 1．早期胰岛素强化治疗有效控制NOD小鼠血糖和体质量在正常水平；
　　 2．早期胰岛素强化治疗可以通过调节宿主脾脏和胸腺淋巴细胞亚群的变化调节自身免疫反应。
　　 第二部分
　　 目的：探讨早期胰岛素持续皮下注射速效门冬胰岛素(CSII-A)、每日使用2次诺和灵30R(BDI)和三餐前门冬胰岛素联合每日睡前1次甘精胰岛素(MDI)三种治疗方案对新发1型糖尿病(TIDM)儿童促进胰岛β细胞再生和功能恢复，延长蜜月期的差异。
　　 方法：近三年新诊断1型糖尿病儿童75例，糖尿病酮症酸中毒(DKA)纠正后分为三组，CSII-A组：12例，平均年龄（9.0±1.9）岁（男8例），诊断1-7天内用胰岛素泵持续输注速效胰岛素类似物门冬胰岛素强化治疗；BDI组：30例，平均年龄（9.2±2.5）岁（男18例），用诺和灵30R-天早晚餐前注射两次；MDI组：33例，平均年龄（8.7±2.0）岁（男19例），门冬胰岛素三餐前皮下注射+长效胰岛素类似物甘精胰岛素睡前一次皮下注射，一天注射4次强化治疗。三组治疗前性别和年龄无显著性差异（P>0.05）。
　　 1．观察治疗3m期间血糖波动(最高及最低血糖之差：BG-F)和治疗前后糖化血红蛋白(HbAlc)变化衡量治疗效果差异；
　　 2．观察治疗前后每天胰岛素用量、血清C肽和蜜月期开始和持续时间比较内源性β-细胞功能和再生差异；
　　 3．观察C-肽与HbAlc和BG-F的直线相关关系。
　　 结果：
　　 1．治疗前各组间每天胰岛素用量、血清C-肽和HbAlc差异无统计学意义（P>0.05）。
　　 2．治疗3m时每天胰岛素用量CSII-A组由0.91±0.10 u/kg-d降至0.36±O.lOu/kg-d，低于BDI和MDI组（0.36±O.lOu/kg-d vs0.51±0.22u/kg-d， P=0.036, CSII-A vs BDI; and0.36±O.lOu/kg-d vs0.39±0.17 u/kg-d,P=0.43, CSII-A vs MDI)。
　　 3．治疗3m期间CSII-A组血糖波动明显低于BDI和MDI组(2.37±0.80mmol/L vs5.9±2.89 mmol/L and3.50±1.64 mmol/L,CSII-A and BDI,MDI; CSII-A vs BDI,P=0.001 and CSII-A vs MDI P=0.014).
　　 4．治疗3m后，CSII-A组HbAlc平均值从发病初13.4±2.2％下降至6.19±0.63％，与BDI和MDI组比较差异均有显著统计学意义（from13.1±2.0％ to7.61±0.93％ for BDI,CSII-A vs BDI，P=0.000:from13.5±2,7％ t06.93±0.62 for MDI, CSII-A vs MDI,P=0.002).
　　 5，CSII-A组C-肽水平治疗3m后由发病时0.23±0.14 ng/mL升至1.86±0.55ng/mL，显著高于BDI和MDI组(1.86±0.55ng/mL vs0.78±0.45 ng/mL and1.86±0.55ng/mL vs1.10±0.54 ng/mL,CSII-A vs BDI,CSII-A vs MDI; P=0．OOO)。
　　 6．治疗3m期间，CSII-A组蜜月期平均开始时间为0.75±0.16 month，显著早于 BDI和MDI组(BDI:1.56±0.44 months,MDI:1.36±0.49 months; CSII-A vs BDI,P=O.OOO and CSII-A vs MDI，P=0.003); CSII-A组蜜月期持续18.75±6.00 months，与BDI和MDI组比较差异有显著统计学意义（BDI:8.74±3.06 months， MDI:11.14±5.60 months; CSII-A vs BDI，P=0.001 and CSII-A vs MDI, P=0.013）。
　　 7．治疗3m后C肽与BG-F及HbAlc均呈显著直线负相关，(r=-0.54和r=-0.65， P　　 结论：早期胰岛素持续皮下注射速效胰岛素强化治疗新发TIDM儿童与每日使用2次诺和灵30R和三餐前门冬胰岛素联合甘精胰岛素强化治疗相比：
　　 1．有效改善血糖波动，同时有效减少每日胰岛素总用量，是TIDM较理想的治疗方案。
　　 2．促使胰岛β细胞再生和功能较早恢复，蜜月期延长。