热休克蛋白60在多西紫杉醇治疗激素非依赖性前列腺癌过程中差异表达的研究

摘要

目的:
　　 本研究根据Docetaxel对激素非依赖性前列腺癌的治疗作用，利用不同浓度Docetaxel诱导PC-3细胞获得凋亡PC-3细胞以及耐药PC-3细胞，然后利用蛋白质组学技术分别比较热休克蛋白60在Docetaxel诱导PC-3细胞凋亡及耐药前后表达的差异，并探讨热休克蛋白60在Docetaxel诱导PC-3细胞产生凋亡和耐药过程中可能的作用和机制。
　　 方法:
　　 首先利用10uM/L、20uM/L、30uM/L、40uM/L和50uM/LDocetaxel处理PC-3细胞，SRB和Hoechst染色同步检测Docetaxel对PC-3细胞的增殖抑制作用和凋亡诱导作用，根据结果利用20μmol/LDocetaxel诱导PC-3细胞凋亡并获得凋亡PC-3细胞，其次利用逐渐加量的方式培养前列腺癌PC-3细胞Docetaxel耐药株;利用双向荧光差异凝胶电泳(DIGE)技术获得未处理组PC-3细胞与凋亡PC-3细胞，PC-3细胞敏感株与耐药株的蛋白表达谱，通过比较蛋白表达谱的差异定量筛选差异蛋白，采用MALDI-TOF-TOF技术对选取的差异蛋白进行分析获得其肽质量指纹图(PMF)，根据肽质量指纹图进行Mascot软件检索确定蛋白质成分，进而检测HSP60在Docetaxel诱导PC-3细胞产生凋亡和耐药前后的差异表达。
　　 结果:
　　 (1)将未处理组PC-3细胞与凋亡PC-3细胞的表达差异的蛋白质点的肽质量指纹图进行Mascot软件检索，发现HSP60在Docetaxel诱导PC-3凋亡细胞中表达上调，差异大于2倍。(2)将PC-3细胞敏感株与耐药株的表达差异的蛋白质点的肽质量指纹图进行Mascot软件检索，发现HSP60在Docetaxel耐药株中表达下调，差异大于2倍。
　　 结论:
　　 (1)HSP60在PC-3凋亡细胞中高表达，提示HSP60可能通过其过表达导致PC-3细胞的凋亡，亦或是由于PC-3的凋亡导致HSP60继发性过表达(2)HSP60在Docetaxel耐药株中的低表达，提示其可能参与PC-3细胞的耐药形成，亦或是PC-3耐药产生后导致HSP60的过表达。综合此研究结果分析，HSP60或许可以作为Docetaxel治疗激素抵抗型前列腺癌的预后评价指标，并为进一步研究HSP60在治疗激素抵抗型前列腺癌疾病发展中的作用提供了实验依据。