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β3肾上腺素能受体激动剂BRL37344对前脂肪细胞分化的影响

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摘要

目的:观察β3肾上腺素能受体激动剂BRL37344对前脂肪细胞分化的影响,并探讨其可能的作用机制。
   方法:分别培养3T3-L1前脂肪细胞及原代人体前脂肪细胞。待两种前脂肪细胞细胞贴壁、融合后2天,开始诱导分化细胞,使之进入分化阶段。在细胞诱导分化的过程中,两种细胞均分为4个不同的处理组:空白对照组,常规分化组,BRL37344处理组,常规分化+BRL37344组;使用不同剂量(10-9,10-8,10-7mol/L)的BRL37344作用8天,各组细胞均进行油红O染色,并提取各组细胞RNA,应用RT-PCR反应检测各组脂肪细胞分化过程的重要调节因子过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisomeproliferatorsactivatedreceptor,PPARγ2),以及它的下游基因同时也是脂肪细胞分化标志基因的脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(adipocytefattyacidbindingproteins,aP2)、脂蛋白脂肪酶(lipoproteinlipase,LPL)mRNA转录水平;并使用10-7mol/LBRL37344处理各组细胞,在选取三个分化时间点(0、2、8d),进行油红O染色,并提取各组细胞的RNA,分别检测在这三天中,各组的细胞内的脂肪细胞分化相关基因PPARγ2、aP2、LPLmRNA的转录水平。
   结果:(1)不同剂量(10-9,10-8,10-7mol/L)的BRL37344作用3T3-L1前脂肪细胞8天后,呈剂量依赖性的下调前脂肪细胞细胞内的PPARγ2、aP2、LPLmRNA的转录水平,其中10-7mol/L刺激作用最强(P<0.05);(2)在选取的3个分化时间点(0、2、8d)中,各组细胞PPARγ2、aP2、LPLmRNA水平均呈线性增加;但与空白对照组相比,BRL37344处理组细胞内PPARγ2、aP2、LPLmRNA水平均降低(P<0.05);与常规分化组相比,常规分化+BRL37344处理组细胞内PPARγ2、aP2、LPLmRNA水平也均降低(P<0.05)。(3)可能由于DMEM/F12培养基配制等的原因,原代人体脂肪细胞培养失败。
   结论:(1)成功建立3T3-L1前脂肪细胞分化模型。(2)β3肾上腺素能受体激动剂BRL37344可抑制3T3-L1前脂肪细胞的分化。(3)BRL37344可下调3T3-L1前脂肪细胞分化过程相关基因PPARγ2、aP2、LPLmRNA的转录水平,这可能是其作用机制。

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