1型糖尿病模型大鼠骨形态计量学动态变化特点的研究

摘要

目的：
　　 观察1型糖尿病模型大鼠骨形态计量学参数的变化特点，探讨糖尿病性骨质疏松大鼠骨代谢变化的关键时间点，为寻找预防和治疗糖尿病性骨质疏松合理的干预时机提供实验依据。
　　 方法：
　　 1.实验分组与模型制作
　　 64只6-8周龄雌性Wistar大鼠，随机分为对照组（C组）和模型组（D组）。实验性糖尿病大鼠一次性腹腔注射60mg/kg的链脲佐菌素(STZ)。C组和D组再根据造模后取样时间第1天、第1周、第2周、第3周、第4周、第8周、第12周、第16周随机分为C1d、C1w、C2w、C3w、C4w、C8w、C12w、C16w组和D1d、D1w、D2w、D3w、D4w、D8w、D12w、D16w组，共16组(n=4)。
　　 2.标本采集
　　 C组、D组大鼠分别于各取样时间称重后，分别以1％氯胺酮按100mg/kg腹腔注射行全身麻醉。取左侧胫骨上段组织于4％多聚甲醛中固定。
　　 3.切片制作与指标检测
　　 取胫骨上段分别进行脱钙、脱水、常规石蜡包埋、切片与HE染色。
　　 1)光镜下观察骨微结构并拍照。
　　 2)用ImageJ1.37V图像分析系统测定并根据公式计算骨小梁面积(Tb.Ar)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁数目(Tb.N)及骨小梁分离度(Tb.Sp)。
　　 结果：
　　 1.骨微结构观察
　　 C组骨微结构随时间进展无明显变化，均可见骨小梁丰富，骨小梁数目较多，骨小梁宽度较宽，连接紧密。与C组相同时间点相比，D1d组无明显差异。D1w组骨小梁开始出现稀疏，骨小梁之间开始出现断裂。D4w组骨小梁宽度明显变窄。D12w组、D16w组骨小梁明显断裂，数目减少。
　　 2.抗骨折能力观察
　　 对照组各时间点大鼠胫骨上段均较坚硬，不易切割。模型组大鼠胫骨上段于第8周开始较脆弱，易折断。
　　 3.骨形态计量学
　　 1)与对照组相比结果:
　　 (1)造模后第1天，与对照组(C1d)相比，Tb.Ar降低，Tb.Th降低，Tb.N降低，Tb.Sp增加，差异无统计学意义。
　　 (2)造模后第1周，与对照组(C1w)相比，Tb.Ar降低，Tb.Sp增加，差异有统计学意义(P＜0.05)。Tb.Th降低，Tb.N降低，差异无统计学意义。
　　 (3)造模后第2周，与对照组(C2w)相比，Tb.Ar降低，Tb.Sp增加，Tb.Th降低，Tb.N降低，差异有统计学意义(P＜0.05)。
　　 (4)造模后第3周，与对照组(C3w)相比，Tb.Ar降低，Tb.Th降低，Tb.N降低(P＜0.05)。Tb.Sp增加，差异有统计学意义（P＜0.01)。
　　 (5)造模后第4周，与对照组(C4w)相比，Tb.Ar降低，Tb.Th降低，Tb.N降低(P＜0.05)。Tb.Sp增加，差异有统计学意义（P＜0.01)。
　　 (6)造模后第8周，与对照组(C8w)相比，Tb.N降低（P＜0.05），Tb.Ar降低，Tb.Th降低，Tb.Sp增加，差异有统计学意义（P＜0.01）。
　　 (7)造模后第12周、第16周，分别与对照组(C12w、C16w)相比，Tb.Ar均降低，Tb.N均降低，Tb.Th均降低，Tb.Sp均增加，差异均有统计学意义(P＜0.01)。
　　 2)模型组组间相比:
　　 (1)Tb.Ar于第1w即开始降低，此后持续降低，第4w降低达8.18％;于第4w-第8w间降低速度最快，幅度最大，达到43.83％;至第8w已降至D1d的48.42％。
　　 (2)Tb.Th于第1w即开始降低，此后持续降低，第4w降低达7.32％;于第4w-第8w间降低速度最快，幅度最大，达到43.76％;至第8w已降至D1d的47.88％。
　　 (3)Tb.N降低较缓和，于第8w-第12w降低幅度最大即0.66％。
　　 (4)Tb.Sp于第1w即开始增加，此后持续增加，第4w增加达8.76％;于第4w-第8w间增加速度最快，幅度最大，达到35.65％;至第8w已增至D1d的46.62％。
　　 结论：
　　 6-8周龄雌性大鼠1型糖尿病模型制备成功后第1w开始骨量降低，第4w后发生急剧的下降，第8周已降低接近50％。1型糖尿病早期即开始出现骨质破坏，提示糖尿病性骨质疏松的预防和治疗应从发病初期即开始进行。

目录

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材料和方法

结果

讨论

结论

附图

参考文献

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