金刚烷胺-油酸药物囊泡的制备、理化性质及其释药研究

摘要

金刚烷胺是一种抗病毒药，主要抑制A型流感病毒的复制。它对治疗人类帕金森症、抑郁症以及可卡因依赖症非常有效。金刚烷胺是一个脂肪族三环伯胺，主要以原形经肾排泄，在体内只经历有限的代谢。其分子不含有共轭结构，因此不能直接用紫外检测方法来检测，文献中已报道的金刚烷胺的分析方法主要有液质联用、气相色谱法、荧光分光光度法等，本论文建立了一种间接测定金刚烷胺含量的分析方法，即酸性染料比色法，金刚烷胺与溴甲酚绿分子反应而衍生出有色基团进而用紫外分光光度计进行检测，间接得到金刚烷胺的含量，这种方法操作相对简便，准确度和灵敏度较好，具有很好的应用前景。
　　 囊泡是由小分子表面活性剂、磷脂及嵌段共聚物等两亲分子在溶液中自组装形成的空心球形或椭球形单室或多室结构。囊泡的结构与原始生物细胞结构相似，所以通常作为生物膜研究的简单模型。囊泡作为药物载体有以下优点:1）避免药物失活;2）增强药物的稳定性;3）降低药物的毒副作用;4）提高机体的免疫功能;5）提高药物的治疗指数和生物利用度。与胶束和微乳液相比，囊泡作为药物载体时药物的增溶量较大，囊泡双层膜具有较强的稳定性，同时，囊泡的尺寸和药物分子的渗透率具有可调节性，因此可更好的控制药物的释放行为。
　　 本论文以抗病毒药物金刚烷胺为模型药物，以油酸为生物相容性表面活性剂通过简单的质子转移反应得到了一种两亲性金刚烷胺油酸复合物，这种复合物含有阳离子的药物部分以及阴离子的表面活性剂部分，所以在水溶液中可组装成囊泡结构，我们称这种结构为阴阳离子药物囊泡。我们通过核磁共振氢谱(1H-NMR)、傅里叶红外(FT-IR)、差式扫描量热(DSC)、X射线衍射(XRD)等技术表征复合物分子的结构，由于复合物含有阳离子药物部分及阴离子的表面活性剂部分，因此它应该具有一定的表面活性，我们用表面张力测定仪测定该复合物的表面张力等温线，发现在室温(25℃)下金刚烷胺-油酸复合物可以将水溶液的表面张力由65mN·m-1降至～34mN·m-1;通过透射电子显微镜(TEM)、浊度测定仪、电导率仪、贝克曼粒径电势测定仪等研究阴阳离子药物囊泡的表观形态、粒径大小、表面带电情况以及溶液的浊度、电导率随复合物浓度的变化情况。研究结果表明，在一定浓度下复合物溶液外观呈淡蓝色，溶液中形成类球形的单层囊泡结构，粒径大小约在200～300nm。我们进一步将金刚烷胺-油酸囊泡包载于生物相容性聚合物(PLGA-PEG-PLGA)凝胶中，进行了体外释放的相关研究。PLGA-PEG-PLGA在一定浓度时室温下是液态，但是在体温37℃状态下可形成凝胶。所以将金刚烷胺-油酸药物囊泡包载于PLGA-PEG-PLGA中可形成具有温度敏感性的凝胶制剂。体外释放结果显示，此温敏凝胶制剂可明显延长药物在体内的滞留时间，金刚烷胺释放长达10天，提高了药物的生物利用度，具有较高的临床应用价值。
　　 综上所述，所制得的阴阳离子药物囊泡在药物缓释方面展现出良好的应用前景，有望成为一种新型的药物传输系统。

目录

声明

摘要

符号说明

前言

1．金刚烷胺的发展史

2．金刚烷胺分析测定方法的选择

2．1 高效液相色谱仪-荧光检测器联用

2．2 高效液相色谱仪-紫外检测器联用

2．3 液相色谱-电喷雾离子-质谱联用

2．4 液相色谱-串联质谱(LC-MS／MS)联用

2．5 毛细管气相色谱分析

2．6 气相色谱-质谱联用

2．7 红外光谱-电位滴定联用

2．8 荧光分光光度法

2．9 高效液相色谱-蒸发光散射(HPLC-ELSD)联用

2．10 紫外分光光度法

3．表面活性剂囊泡的发展

4．本文的研究目的

第一章 金刚烷胺-油酸囊泡分析方法学考察

1 材料与方法

1．1 仪器

1．2 药品试剂

2．方法与结果

2．1 金刚烷胺分析方法的建立

2．2 金刚烷胺的溶解性

3．讨论

4．本章小结

第二章 金刚烷胺-油酸复合物的制备及结构表征

1．实验材料与仪器

1．1 材料

1．2 仪器

2 实验方法

2．1 样品制备

2．2 样品结构的确定及表征

3 结果及讨论

3．1 核磁共振氢谱(1H-NMR)分析

3．2 傅里叶-红外光谱(FTIR)分析

3．3 差式扫描量热(DSC)分析

3．4 X射线衍射(XRD)结果分析

4．本章小结

第三章 金刚烷胺-油酸药物囊泡的形成、理化性质表征及体外释放研究

1．实验部分

1．1 AT-OA药物囊泡的形成

1．2 金刚烷胺-油酸复合物溶液表面张力的测定

1．3 聚集体的外观形态

1．4 聚集体溶液电导率的测量

1．5 聚集体溶液浊度的考察

1．6 聚集体溶液粒径及粒径分布的测量

1．7 Zeta电势的测量

1．8 PLGA-PEG-PLGA温敏凝胶的制备以及相变温度的确定

1．9 药物体外释放行为的研究

2．结果与讨论

2．1 表面张力测定

2．2 聚集体形貌研究

2．3 不同浓度复合物溶液的电导率

2．4 不同复合物溶液的浊度

2．5 粒径测定

2．6 金刚烷胺-油酸复合物水溶液中聚集体电势测定

2．7 嵌段共聚物PLGA-PEG-PLGA相变温度的测定

2．8 药物体外释放的研究

2．9 药物释放动力学的模拟

3．本章小结

结论与展望

1．全文总结

2．创新及展望

参考文献

致谢

攻读硕士学位期间发表学术论文目录

综述

学位论文评阅及答辩情况表