一氧化碳释放分子CORM-2对大鼠实验性牙周炎的影响

摘要

目的:
　　 牙周炎(periodontitis)是危害人类口腔健康的严重疾病。研究表明，牙周致病菌引发的宿主免疫炎性反应是牙周组织破坏的主要原因。因此，抑制牙周炎病理进程中的炎性反应，以降低其对牙周组织的破坏是牙周炎药物治疗的主要靶点。近年来大量研究表明CO能减少多种类型细胞，如血管内皮细胞，单核细胞，巨噬细胞等，在炎性环境下炎性因子的表达，有效抑制炎症反应进程。一氧化碳释放分子（carbonmonoxidereleasingmolecule，CORM）作为一组新型的合成化合物能够在生理环境下可控的释放一氧化碳，具有与CO相似的生物学行为，可作为外源性CO的供源。本实验以Wistar大鼠为体内试验动物模型，拟研究CORM-2对大鼠实验性牙周炎的影响，初步探讨CO在牙周炎治疗中的作用，以期为牙周炎的临床治疗提供实验数据和理论依据。
　　 方法:
　　 1.动物分组与建模:选用42只8周龄健康雄性Wistar大鼠，质量(210±20)g，随机分为正常组(NL组，n=6)、牙周炎组（LO组，n=18）及一氧化碳干预组（CO组，n=18）。CO组及LO组采用牙周丝线结扎法建立牙周炎模型。NL组不作任何处理。建模当天起CO组经腹腔注射CORM-2(10mg/kg/d)连续10天，LO组注射等体积无菌生理盐水。
　　 2.实验室检测:分别于牙周结扎3d、7d、10d后各组随机抽选6只大鼠自心脏抽取静脉血，用ELISA方法检测血清中TNF-α及IL-1β的含量。10d后处死各组大鼠并制取双侧下颌骨标本，每只大鼠随机抽选一侧下颌骨经1％甲苯胺蓝染色后于体视显微镜下测量牙槽嵴吸收高度，另一侧经脱钙、透明、包埋后制作常规石蜡切片，光镜下观察牙周组织炎细胞浸润情况。
　　 3.统计学分析:采用SPSS17.0统计软件进行检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。
　　 结果:
　　 1.动物模型建立结果:所有建模动物经组织学和大体标本观察，均显示牙周组织有大量炎细胞浸润、牙周袋形成和牙槽骨吸收。表明大鼠牙周炎模型建立成功。
　　 2.血清标本检测结果:正常组大鼠血清中仅含有极微量的TNF-α及IL-1β。建模同时期后LO组大鼠血清中TNF-α及IL-1β含量显著高于CO组及NL组(P＜0.05)。随着建模时间的延长，LO组大鼠血清中TNF-α及IL-1β的含量逐渐升高。
　　 3.大体标本观测结果:大鼠下颌第一磨牙丝线结扎10d后，CO组及LO组均出现不同程度的下颌骨吸收，其中LO组牙槽骨的吸收高度高于CO组及NL组，差异有统计学意义。NL组牙槽骨吸收高度低于CO组（P＜0.05）。
　　 4.组织学观测结果:NL组大鼠牙周组织完整，几乎不可见炎性细胞的浸润;CO组大鼠牙周袋形成，可见少量炎性细胞浸润;LO组大鼠牙周袋形成，探诊深度显著大于CO组，可见大量炎性细胞浸润。LO组炎细胞浸润指数为2的比例为87.3％，显著高于CO组及NL组的16.7％及0％(P＜0.05)。
　　 结论:
　　 1.CORM-2减少了实验性牙周炎大鼠牙周组织炎细胞的浸润和牙槽骨的吸收，并降低大鼠血清中TNF-α及IL-1β的含量。
　　 2.CORM-2能有效抑制大鼠实验性牙周炎的病理进程，为牙周病的治疗提供一个新的思路。

目录

声明

摘要

符号说明

前言

材料和方法

1．实验材料

2．实验方法

结果

1．动物模型建立结果

2．血清标本检测结果

3．大体标本观测结果

4．组织学观测结果

讨论

1．牙周炎模型建立方法选择

2．TNF-α、IL-1β与牙周炎的关系

3．CO在炎性环境下的作用及机制

4．CO在牙周病治疗中的应用前景

结论

1．动物模型建立成功

2．CORM-2抑制实验性牙周炎大鼠血清中TNF-α及IL-β的升高

3．CORM-2抑制实验性牙周炎大鼠牙槽骨吸收

4．CORM-2抑制实验性牙周炎大鼠牙周组织中炎细胞的浸润

5．综上认为CORM能有效抑制大鼠实验性牙周炎的病理进程，为牙周炎的治疗提供了一种新的极具潜力的方向

附图

参考文献

致谢

攻读硕士期间发表的论文