二甲双胍抑制晚期糖基化终产物诱导的大肠癌细胞侵袭和上皮间质转化

摘要

目的：探讨二甲双胍对人大肠癌细胞增殖，侵袭和上皮间质转化(EMT)影响。
　　方法：将SW-480细胞分为为对照组、AGEs组、二甲双胍组、二甲双胍+AGEs组，分别采用PBS、晚期糖基化终末产物、二甲双胍、晚期糖基化终末产物+二甲双胍进行处理。分别采用MTT法检测二甲双胍对SW480细胞活力影响;采用碘化丙啶染色检测细胞中的DNA含量的方法评价细胞周期;采用AnnexinⅤ-FITC和碘化丙锭双染来对四组SW-480细胞凋亡进行检测;采用Boyden小室侵袭实验对四组SW-480细胞的侵袭能力进行检测;采用Western Blotting法对四组细胞中E-cadherin或Vimentin蛋白表达水平检测。
　　结果：(1)AGEs组在24小时、48小时和72小时的吸光度值均显著性的高于相同时间点对照组的吸光度值(P＜0.05);二甲双胍组在12小时、24小时、48小时和72小时的吸光度值与对照组的吸光度值没有显著性的差异(P＞0.05); AEGs+二甲双胍组在24小时、48小时和72小时的吸光度值显著性的小于相同时间点AGEs组的吸光度值(P＜0.05)。
　　(2)AGEs组细胞的G0/G1期的比例显著性的低于对照组，AGEs组细胞的S期比例显著性的高于对照组(P＜0.05);AGEs+二甲双胍组细胞的G0/G1期的比例显著性的高于AGEs组，AGEs+二甲双胍细胞的S期比例显著性的低于AGEs组(P＜0.05);对照组、AGEs组、二甲双胍组和AGEs+二甲双胍组细胞间的G2/M期比例没有显著性的差异(P＞0.05)。
　　(3)AGEs组细胞凋亡率与对照组没有显著性的差异(P＞0.05);二甲双胍组和AGEs+二甲双胍组的细胞凋亡率均显著性的高于对照组(P＜0.05);AGEs+二甲双胍组的细胞凋亡率显著性的高于二甲双胍组(P＜0.05)。
　　(4)二甲双胍组细胞的侵袭指数与对照组细胞比较没有显著性的差异(P＞0.05);AGEs组细胞的侵袭指数显著性的高于对照组(P＜0.05);AGEs+二甲双胍组细胞的侵袭指数显著性的小于AGEs组(P＜0.05)。
　　(5)二甲双胍组的E-cadherin和Vimentin表达水平与对照组没有显著性的差异(P＞0.05);AGEs组的E-cadherin表达水平显著性的低于对照组，AGEs组的Vimentin表达水平显著性的高于对照组(P＜0.05);AGEs+二甲双胍组的E-cadherin表达水平显著性的高于AGEs组，AGEs+二甲双胍组的Vimentin表达水平显著性的低于AGEs组(P＜0.05)。
　　结论：二甲双胍对AGEs诱导的大肠癌细胞显示了抗肿瘤效应，其机制可能与抑制EMT过程有关。

目录

声明

摘要

1 材料与方法

1．1 实验材料

1．2 实验方法

1．2．1 主要试剂的配制

1．2．2 指标检测

1．3 统计学处理

2 结果

2．1 二甲双胍抑制AQEs诱导的大肠癌细胞生长

2．2 二甲双胍对大肠癌细胞周期的影响

2．3 二甲双胍对大肠癌细胞凋亡的影响

2．4 二甲双胍抑制AGE诱导的大肠癌细胞侵袭

2．5 二甲双胍抑制AGEs诱导的大肠癌细胞EMT标志蛋白E-cadhorin表达

2．6 二甲双胍抑制AGEs诱导的大肠癌细胞ETM标志蛋白Vimentin表达

3 讨论

4 结论

参考文献

致谢

综述

攻读学位期间取得的研究成果