儿童手足口病危重并发症与其免疫功能相关性的研究

摘要

目的：
　　手足口病(hand-foot-mouth disease，HFMD)是一种儿童时期由多种肠道的病毒感染引起的较常见的传染病。肠道病毒71型(enterovirus71，EV71)及A组柯萨奇16型病毒(coxsackie virusA16，CoxA16)是引起手足口病的非常重要的肠道病毒。EV71具有嗜皮肤性与嗜神经性。其临床表现可轻可重，重者则可出现中枢损害、呼吸系统损害、脑炎、急性弛缓性麻痹等严重并发症，少数危重症患者病情进展迅猛，可短期内发生临床死亡。EV71感染引起危重症的发病机制目前尚未完全阐明。考虑可能与病毒直接侵犯机体组织细胞及病毒所引起的异常的免疫反应有关。本文着重探讨患儿手足口病危重并发症的发生与其免疫功能的相关性。
　　方法：
　　以2014年4月到2016年7月间我院收治的573例手足口病患儿作为研究对象，同时期的健康查体儿童82人为对照。研究对象包括男性患儿377例及女性患儿196例，男性患儿与女性患儿比率约为1.92∶1;患儿年龄最小者4月，最大者6岁，平均年龄2.5岁，其中小于3岁的患儿为478例。根据病情分为普通病例组（无神经、呼吸、循环受累）367例，重型病例组（出现神经系统受累表现）147例，危重型病例组（除神经系统受累外，出现下列情况之一者:①反复惊厥、出现昏迷、脑疝;②呼吸窘迫、口唇紫绀、咯血性泡沫痰、肺部存在湿哕音等;③休克等循环功能不全表现）59例，以82例同时期同年龄的健康查体儿童为对照组。
　　应用流式细胞术检测患儿外周血中的T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+)百分比。同时应用流式细胞术检测患儿外周血中的NK细胞及CD16+％NK细胞亚群所占比例。收集完成淋巴细胞亚群检测过程中，弃用的血浆备用，用ELISA法分别检测血浆细胞因子TNF-α，IL-6，IL-10水平。
　　所有数据以平均值±均数标准误(mean±SEM)的形式表示，利用采用单因素方差分析比较正常对照组与手足口病患者轻型、重型及危重型之间的差异，使用Pearson's相关性检验分析的方法来进行相关性分析，以P＜0.05提示统计学有显著性的意义。
　　结果：
　　1.手足口病患者的T淋巴细胞亚群数值与健康对照组比较:CD3+、CD4+、CD8+数值皆减低，且减低明显，差异具有统计学意义(P＜0.05)。重型病例组及危重型病例组CD3+、CD4+、CD8+T细胞与普通病例组比较，其数值减低更明显(P＜0.01)，危重型病例组与重型病例组相比，危重型病例组CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞较重型组减低明显，差异有统计学意义(P＜0.05)。各组间CD4+/CD8+差异无统计学意义(P＞0.05)。
　　2.NK细胞的比例在手足口病例组与同期健康查体对照组比较，虽有减低，但差异无统计学意义(P＞0.05);重型病例组及危重型病例组与普通病例组比较，明显减低(P＜0.05);重型组与危重型组两组间无统计学差异(P＞0.05);手足口病例组与健康查体对照组比较，CD16+ NK细胞亚群比值增高(P＜0.05)，重型病例及危重型病例组与普通病例组相比减低，但差异无统计学意义(P＞0.05);重型组与危重型组两组间无统计学差异(P＞0.05)。
　　3.重型病例组、危重型病例组与普通病例组患者血浆TNF-α、IL-6、IL-10水平较对照人群明显增高(P＜0.01)，与普通病例组比较重型病例组及危重型病例组TNF-α、IL-6、IL-10增高更明显，差异有统计学意义(P＜0.05)。TNF-α与IL-6水平正相关(r=0.831，P＜0.01)。TNF-α与IL-10水平正相关(r=0.814，P＜0.01)。IL-6与IL-10水平正相关(r=0.787，P＜0.05)。
　　结论：
　　1.手足口病重型病例组、危重型病例组CD3+、CD4+、CD8+T细胞的数值下降明显，外周血内NK减低明显，CD16+NK细胞比值较普通组减低。
　　2.手足口病患儿重型病例组、危重型病例组与普通病例组血浆TNF-α、IL-6、IL-10等炎症相关细胞水平较正常对照组增加明显，三者之间存在一定的相关性，提示可能存在相互调节。
　　3.手足口病危重症患儿细胞免疫功能减低明显，细胞因子也有相应改变，免疫调节亦紊乱，在今后的手足口病治疗中可考虑采用免疫支持。

目录

声明

摘要

符号说明

前言

材料与方法

1．1 材料

1．2 试剂

1．3 主要实验仪器

1．4．流式细胞仪检测

1．5 细胞因子ELISA分析

1．6 PCR检测咽拭子肠道病毒(EV、EV71、COXA16)

1．7 统计分析

结果

讨论

结论

附表

参考文献

综述 手足口病对机体免疫状态的影响

致谢