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摘要
缩略词
第一章 前言
1.1 鼠李糖脂
1.1.1 表面活性剂概述
1.1.2 生物表面活性剂概述
1.1.3 鼠李糖脂的结构
1.1.4 鼠李糖脂的合成及其调控
1.1.5 鼠李糖脂的应用
1.1.6 鼠李糖脂的发酵条件
1.1.7 提高鼠李糖脂产量的方法
1.1.9 减毒PAO1
1.2 盐霉素
1.2.1 盐霉素基本概述
1.3 Red/ET重组工程
1.3.1 Red/ET同源重组
1.3.2 位点特异性重组
1.3.3 温敏型质粒
1.3.4 DNA定点突变和无痕修饰
1.4 立题依据
第二章 鼠李糖脂减毒高产菌株的构建
2.1 引言
2.2 实验材料
2.2.1 主要试剂
2.2.2 主要仪器
2.2.3 培养基
2.2.4 菌株质粒
2.2.5 抗生素和寡核苷酸
2.3 实验方法
2.3.1 电转化感受态铜绿假单胞菌细胞的制备
2.3.2 线线重组
2.3.3 线环重组
2.3.4 PCR扩增体系
2.3.5 质粒小量提取步骤
2.3.6 酒精沉淀
2.3.7 鼠李糖脂提取方法
2.3.8 鼠李糖脂高产菌株的构建
2.4 结果与分析
2.4.1 鼠李糖脂高产菌株的构建
2.4.2 鼠李糖脂产量测定
2.4.3 鼠李糖脂乳化实验
2.4.4 外源质粒稳定性检测
2.5 讨论
盐霉素基因簇salBⅢ基因功能研究
3.1 引言
3.2 实验材料
3.2.1 主要试剂和仪器
3.2.2 培养基
3.2.3 菌株和质粒
3.2.4 抗生素和寡核苷酸
3.3 实验方法
3.3.1 BAC无痕修饰
3.3.2 Amp-ccdB PCR扩增体系
3.3.3 BAC酶切
3.4.4 诱导启动子插入
3.3.5 电转化感受态大肠杆菌细胞的制备
3.3.6 电转化感受态伯克氏菌细胞的制备
3.3.7 接合转移
3.3.8 受体菌发酵和化合物提取
3.3.9 HPLC-MS鉴定条件
3.4 实验结果
3.4.1 诱导启动子插入
3.4.2 BAC无痕修饰
3.4.3 盐霉素发酵
3.5 讨论
第四章 总结与展望
参考文献
致谢