声明
摘要
符号说明
1 多糖的研究概况
1.1 多糖的提取与分离
1.2 多糖的结构分析
1.3 含葡聚糖结构多糖的药理活性研究
1.4 含葡聚糖结构多糖的免疫活性与结构关系研究进展
1.5 分子量与免疫活性的关系
1.6 含葡聚糖结构多糖免疫活性的分子机制的研究进展
2 Toll样受体4(TLR4)通路相关多糖的研究进展
2.1 TLR4通路相关多糖的单糖组成
2.2 常见TLR4通路相关杂多糖聚合类型
2.3 常见TLR4通路相关同多糖糖苷键类型
2.4 TLR4通路相关多糖免疫作用靶标细胞
2.5 TLR4通路相关多糖与蛋白质相互作用
2.6 TLR4通路相关多糖研究的小结和展望
3 TLR4介导的信号通路中潜在的炎症治疗靶点研究进展
3.1 NF-κB和上游靶标
3.2 AP-1和上游靶点
3.3 其他靶标
3.4 小结
4 本课题设计思路及拟解决问题
第二章 黄原胶(XG)体外免疫药理学效应研究
1 研究背景
2 实验材料
2.1 主要试剂与抗体
2.2 主要仪器设备
2.3 实验溶液的配制
3 实验方法
3.1 巨噬细胞培养
3.3 巨噬细胞形态学观察
3.4 NO测定
3.5 典型细胞炎症因子测定
3.6 Western blot分析
3.7 RAW264.7 巨噬细胞吞噬功能的测定
3.8 荧光定量RT-PCR检测炎症因子mRNA水平
3.9 SPR技术分析XG与TLR4的结合性质研究
3.10 数据分析
4 实验结果
4.1 XG对RAW264.7 细胞生存或增殖的影响
4.2 XG对RAW264.7 巨噬细胞形态学的影响
4.3 XG对RAW264.7 细胞NO释放的影响
4.4 XG对RAW264.7 细胞吞噬FITC标记的葡聚糖功能的影响
4.5 XG对RAW264.7 细胞产生炎症因子IL-1β,IL-6,and TNF-α的影响
4.6 XG对RAW264.7 细胞炎症因子和细胞因子mRNA表达的影响
4.7 XG抑制了LPS诱导的RAW264.7 细胞iNOS和COX-2的表达
4.8 XG和LPS与TLR4蛋白的亲和性质的研究
5 讨论
6 结论
第三章 黄原胶XG作用于TLR4胞内信号转导机制研究
1 研究背景
2 实验材料
2.1 主要试剂与抗体
2.2 主要仪器设备
2.3 实验溶液的配制
3.3 实验方法
3.1 巨噬细胞培养
3.4 Western blot分析
3.6 SPR分析XG与Dectin-1、TLR2的结合性质研究
3.7 数据分析
4 实验结果
4.1 透射电镜(TEM)观察XG对RAW264.7 巨噬细胞胞内细胞器形态学的影响
4.2 抗TLR4抗体对XG抑制LPS诱导RAW264.7 细胞的NO释放的影响
4.3 XG对RAW264.7 细胞胞内MAPK信号通路蛋白表达的影响
4.4 XG对RAW264.7 细胞NF-κB活化和核移位的影响
4.5 XG与TLR2、Dectin-1蛋白的亲和性质的研究
5 讨论
3.6 结论
第四章 贻贝(Mytilus COYRSC跖S)多糖MP-A作用于活化的巨噬细胞TLR4受体的药理学效应及机制的研究
1 研究背景
2 材料与方法
2.1 主要试剂与抗体
2.2 主要仪器设备
2.3 实验溶液的配制
3 实验方法
3.3 THP-1巨噬细胞吞噬功能检测
3.7 NF-κB活化和核易位检测
3.8 SPR测定MP-A与TLR4,TLR2和Dectin-1的亲和力
3.9 统计分析
4 实验结果
4.2 MP-A对THP-1细胞NO释放量的影响
4.3 MP-A对THP-1细胞吞噬FITC标记的葡聚糖的影响
4.4 MP-A抑制LPS刺激的THP-α细胞的TNF-α和PGE2释放
4.5 MP-A抑制LPS刺激的THP-1细胞中的iNOS和COX-2表达
4.6 MP-A抑制LPS诱导的THP-1细胞中MAPK和NF-κB的磷酸化
4.7 MP-A减弱LPS诱导的THP-1细胞中NF-κB活化和的核易位
4.8 MP-A与重组TLR4,TLR2和Dectin-1的亲和性质的研究
5 讨论
6 结论
参考文献
总结和展望
博士期间的论文成果
致谢
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