蒙、汉族散发性乳腺癌中BRCA1、VEGF与MVD的表达及相关性研究

摘要

目的与背景:
　　乳腺癌(Breast Cancer)是妇女最常见的恶性肿瘤之一,在全世界范围内,发病率呈逐年上升的趋势,在我国国内多个大中城市中[1],它已成为威胁女性生命恶性肿瘤的首位死因。内蒙古地区各民族妇女乳腺癌的发病率也在逐年增加,蒙古族是内蒙古地区的主体民族,有着不同于汉族的遗传背景和生活方式,目前国内外对蒙古族女性乳腺癌的研究甚少。乳腺癌可分为遗传型和散发型两类,遗传型约占5％,散发型约占95%。乳腺癌易感基因1(breast cancer susceptibility gene1,BRCA1)是遗传性乳腺癌和卵巢癌的易感基因。
　　研究发现,也是一种抑癌基因,自从1994年Miki[2]等将乳腺癌易感基因BRCA1首次成功地定位、分离克隆出来后,国内外学者对其进行了大量的研究,但大多数都集中于家族遗传性乳腺癌方面的研究,对散发性乳腺癌(sporadic breast cancer,SBC)的研究相对较少,国外研究表明,BRCA1变异显示出一定的地区和种族差异,其中以西欧Ashkenazi Jewish人的遗传性乳腺癌BRCA1突变率最为显著,达到其他种族的4倍[3]。而国内有关民族和地区方面的研究开展的不多,仅有新疆、宁夏和吉林等地,研究过维吾尔族、回族和朝鲜族与汉族之间的差异,且大多无阳性结果,目前对蒙古族散发性乳腺癌方面的研究未有报道。故有必要针对内蒙古地区族女性散发性乳腺癌组织中 BRCA1的表达分布情况及与汉族间的区别进行研究。大多实体恶性肿瘤的生长、扩散及转移,离不开充足的营养成分,丰富的营养物质必须由大量血管来提供,否则将发生缺氧和坏死。因此,大量的新生血管的形成是恶性肿瘤细胞无限增殖、浸润及转移基础,乳腺癌也不例外。
　　血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)是新近发现的功能最强、作用最直接的促进血管内皮细胞分裂增殖的生长因子,它能促进肿瘤新生血管形成,为肿瘤的生长、浸润及转移创造条件。而微血管密度(micro vessel density,MVD)又是检测肿瘤血管形成活性的重要指标,这两者联合研究是目前大多学者研究侵袭转移性癌的探讨热点,但与 BRCA1三者联合研究的,目前国内外尚无报道。
　　为此,本研究通过免疫组化 SP法,对内蒙古中西部地区蒙古族与汉族散发性乳腺癌中抑癌基因BRCA1、VEGF和MVD的表达进行检测,结合临床病理特征,探讨三者在蒙古族散发性乳腺癌妇女中的表达特点及其与汉族乳腺癌间的差异及相互关系,以期在蒙古族散发性乳腺癌临床诊断、治疗、转移潜能方面寻找分子生物学和遗传学规律的新方法,将对临床个体化治疗及预后判断具有重要的意义。这就是本研究的目的和创新点所在。
　　方法:
　　本研究应用免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)方法(S-P法)选择内蒙古中西部呼包鄂金三角地区多个中心2007年1月至2011年10月间的32例蒙古族和52例汉族女性散发性乳腺癌患者石蜡标本,检测其组织中 BRCA1、VEGF和MVD的表达情况,并以22例蒙古族女性和20例汉族女性乳腺良性肿瘤及癌旁组织分别作为对照,分析三者在蒙、汉族妇女中表达的差异特点和相关性及其与临床病理特征间的关系。
　　结果:
　　检测蒙古族32例散发性乳腺浸润性导管癌(Invasive ductal carcinoma of the breast,BIDC)组织中,BRCA1蛋白11例缺失表达,21例阳性表达,阳性表达率为65.62%,检测汉族52例散发性BIDC组织中,BRCA1蛋白22例缺失表达,30例阳性表达,阳性表达率为57.69%,BRCA1蛋白在蒙古族乳腺癌中的阳性表达率明显高于汉族乳腺癌中的阳性表达率,但两民族间 BRCA1阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05)。蒙古族与汉族乳腺癌组织中BRCA1阳性表达率明显低于癌旁组织及良性疾病组织,BRCA1在三类组织的阳性表达率蒙古族分别为65.62%、90%、100%;汉族分别为57.69%、80%、100%,BRCA1阳性表达呈递增趋势,差异均有统计学意义(P<0.05)。BRCA1分别在癌旁组织及良性疾病组织中阳性表达率两民族间差异无统计学意义(P>0.05)。蒙、汉两民族乳腺癌组织中BRCA1的表达率与病理特征中的淋巴结转移有关,呈负相关,差异有统计学意义(P<0.05)。而与患者年龄、肿瘤大小、ER、PR、Her-2均无关。蒙古族与汉族乳腺癌组织中VEGF及MVD的阳性表达率亦均明显高于乳腺良性疾病组织及癌旁组织阳性表达率,三种组织中VEGF阳性表达率及MVD值:蒙古族VEGF阳性表达率分别为84.37%、58.33%、40%,MVD值为31.24±7.14、17.97±2.78、10.80±3.38;汉族VEGF阳性表达率分别为80.77%、50%、40%,MVD值为30.63±6.78、15.29±2.56、9.83±1.27,两者阳性表达均呈递减趋势,差异有统计学意义(P<0.05)。而VEGF及MVD分别在乳腺癌、良性疾病及癌旁组织三类组织中两民族间阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05)。蒙、汉两民族乳腺癌组织中VEGF的表达率与病理特征关系中:汉族VEGF的表达与患者年龄、肿瘤大小、ER、 PR、Her-2均无关,与临床分期、组织学分级及淋巴结转移有关,差异有统计学意义(P<0.05)。而蒙古族 VEGF的表达仅与淋巴结转移有关,与其他各病理特征均无相关性。蒙、汉两民族乳腺癌组织中MVD的表达与临床病理特征关系中,虽与患者年龄、临床分期、组织学分级、肿瘤大小、淋巴结转移、ER、PR、Her-2均无统计学差异(P>0.05),但两民族MVD的表达在临床分期、组织学分级、肿瘤大小、淋巴结转移特征方面呈递增趋势,经统计学两两比较,汉族在临床分期中I期与II、III期间,组织学分级的I级与II、III级间及有、无淋巴结转移间有统计学差异(P<0.05),而蒙古族除上述方面有统计学差异外,肿瘤<2cm与>5cm间有统计学差异(P<0.05)。
　　蛋白表达相关分析中显示:蒙、汉族BRCA1表达阴性组的乳腺癌组织VEGF表达的比率均为100%,而BRCA1阳性组乳腺癌组织中蒙、汉族VEGF表达的比率分别为76.1%和67.7%。阴性组明显高于BRCA1蛋白表达阳性组VEGF的表达,两者呈负相关,均有统计学差异(P<0.05)。同样BRCA1阴性表达组的乳腺癌组织中MVD表达蒙、汉族分别34.72±6.18和34.6±6.01明显高于阳性组乳腺癌组织中蒙、汉族表达的28.39±7.04和27.71±5.74。两者均有统计学差异(P<0.05),两者呈负相关,即显示蒙、汉族乳腺癌组织中BRCA1表达与VEGF蛋白表达及MVD表达均呈负相关性,而在民族之间无统计学差异。蒙、汉族乳腺癌组织中VEGF蛋白表达与MVD表达两者呈正相关,VEGF阳性表达组的乳腺癌组织中MVD值蒙、汉族分别32.6±5.90和32.95±6.32明显高于VEGF阴性表达组乳腺癌组织中表达的22.3±2.46和22.0±1.79两者均有统计学差异(P<0.05),民族之间无统计学差异,各病理特征均在民族间无统计学意义。
　　结论:
　　通过本课题的研究可以得出,内蒙古中西部地区蒙古族与汉族散发性乳腺癌中抑癌基因BRCA1表达缺失率明显高。BRCA1在癌旁组织及乳腺良性肿瘤组织中表达率高。蒙、汉两民族BRCA1表达与淋巴结转移呈负相关,提示BRCA1的失表达可能在乳腺癌的发生、发展过程中起作用。VEGF和MVD在乳腺癌组织中表达较在癌旁组织及乳腺良性疾病组织中表达率高。蒙、汉两民族乳腺癌组织 VEGF，MVD表达与淋巴结转移呈正相关,提示VEGF与MVD在乳腺癌的生长过程中发挥了重要作用,并参与了癌细胞浸润和转移机制。在蒙、汉两民族散发性乳腺癌组织中BRCA1的表达VEGF，MVD呈负相关,而VEGF表达与MVD呈正相关,所有表达结果在民族间均无统计学差异性,即与民族无关。提示 BRCA1的表达缺失及VEGF、MVD高表达与肿瘤细胞的侵袭强、转移早、恶性程度,预后较差有关。BRCA1高表达可能参与了细胞凋亡,VEGF和MVD可能共同促进乳腺癌血管生成,使其更容易发生侵袭和转移。所以BRCA1高表达可以抑制VEGF促血管生成作用,从而,减缓肿瘤细胞的快速侵袭转移,提高生存率,临床对判断预后具有重要的意义。另外民族间BRCA1、VEGF和MVD的表达无差异,提示内蒙古地区蒙古族与汉族乳腺癌的发病无显著性差异。

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1 前言

2 材料与方法

2.1 材料

2.2 实验方法与步骤

2.3 结果判断

2.4 统计学处理

3 结果

3.1 BRCA1、VEGF 及 MVD 在蒙、 汉两民族乳腺癌、乳腺良性病变及癌旁正常组织中免疫组化染色结果

3.2 蒙、汉两民族BIDC中 BRCA1、VEGF及MVD蛋白表达

3.3 蒙、汉两民族乳腺癌、乳腺良性病变及癌旁正常组织中BRCA1、VEGF及MVD

3.4 蒙、汉两民族BIDC中 BRCA1、VEGF及MVD蛋白表达与临床病理特征关系

3.5 蒙、汉两民族乳腺癌中 BRCA1 蛋白表达与VEGF蛋白及MVD表达三者之间的关系

4 讨论

4. 1 BRCA1在乳腺癌的表达及与临床病理特征的关系

4.2 VEGF在乳腺癌的表达及与临床病理特征的关系

4.3 MVD在乳腺癌的表达及与临床病理特征的关系

4.4 BRCA1、VEGF及MVD蛋白表达相互关系

4.5 BRCA1、VEGF及MVD蛋白表达与民族的关系

5 结论

致谢

参考文献

附图

综述

作 者 简 介

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