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摘要
缩略词
第一章绪论
1．1禽腺病毒血清4型及其引起的相关疾病
1．1．1分类地位
1．1．2形态结构
1．1．3基因组结构与功能
1．1．4流行病学
1．2禽腺病毒反向遗传学技术与基因工程载体的研究进展
1．2．1禽腺病毒反向遗传学技术
1．2．2禽腺病毒基因工程载体的研究进展
1．3鸡传染性法氏囊病及其防控
1．3．1鸡传染性法氏囊病病毒病原学研究进展
1．3．2鸡传染性法氏囊病疫苗研究进展
1．4 Red／ET重组工程
1．4．2 Red／ET重组工程的工作原理
1．4．3 Red／ET重组工程的操作步骤
1．4．4 Red／ET重组工程的应用
1．5立题依据和意义
1．6技术路线
第二章高致病性禽腺病毒4型流行毒株反向遗传操作体系的建立
引言
2．1．1菌株、质粒和细胞
2．1．2分子生物学试剂
2．1．3仪器设备
2．1．4培养基和溶液
2．1．5分子生物学分析工具
2．1．6寡核苷酸合成
2．2实验方法
2．2．1 PCR
2．2．2酒精沉淀
2．2．3大肠杆菌的电转化方法
2．2．4大肠杆菌中质粒的小提制备和酶切鉴定
2．2．5禽腺病毒血清型4型毒株CH／HNJZ／2015的基因组制备
2．2．6 FAdV-4毒株CH／HNJZ／2015全长基因组感染性克隆的构建
2．2．7重组病毒rHNJZ的拯救
2．3实验结果与分析
2．3．1直接克隆载体的PCR扩增
2．3．2 FAdV-4毒株CH／HNJZ／2015基因组的直接克隆
2．3．3重组病毒rHNJZ的拯救
2．3．4重组病毒rHNJZ在LMH细胞上的复制动态
2．4总结与讨论
第三章表达鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白的重组禽腺病毒的构建
引言
3．1实验材料
3．1．1菌株、质粒、毒株及细胞
3．1．2主要的仪器和试剂
3．1．3培养基和溶液
3．1．4寡核苷酸合成和测序
3．2实验方法
3．2．1质粒pR6K-CMV-ampccdB-BGHpA的构建
3．2．2重组病毒质粒p15A-cm-HNJZ-1966-IBDV-VP2的构建
3．2．3重组病毒rHNJZ-1966-IBDV-VP2的拯救
3．2．5 VP2蛋白在重组病毒rHNJZ-1966-IBDV-VP2中的表达检测
3．2．6重组病毒rHNJZ-1966-IBDV-VP2的体外复制动力学研究
3．2．7重组病毒rHNJZ-1966-IBDV-VP2的遗传稳定性评价
3．3实验结果与分析
3．3．2重组质粒p15A-cm-HNJZ-1966-IBDV-VP2的构建
3．3．3重组病毒rHNJZ-1966-IBDV-VP2的拯救
3．3．4重组病毒rHNJZ-1966-IBDV-VP2中VP2基因的表达
3．3．5重组病毒rHNJZ-1966-IBDV-VP2在LMH细胞上的复制动态
3．3．6重组病毒rHNJZ-1966-IBDV-VP2的遗传稳定性鉴定
3．4总结与讨论
第四章总结与展望
4．1高致病性禽腺病毒4型流行毒株反向遗传操作体系的建立
4．2表达鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白的重组禽腺病毒的构建
参考文献
致谢
攻读学位期间发表的研究论文
山东大学;
