微山湖湖底淤泥可培养放线菌多样性以及产活性物质的研究

摘要

放线菌的种类非常丰富，能够产生很多活性物质用于生物防治和生物制药,包括农业杀虫剂、抗生素类药物和抗肿瘤药物等，所以近年来对于放线菌及其活性产物的研究受到了越来越广泛的重视。本文主要是对从微山湖采集的淤泥样品进行分离筛选，并对所得放线菌的种类和抗菌活性进行了初步的鉴定和研究。
　　对从微山湖采集的样品进行分离纯化后总共得到21株放线菌，仔细观察这21株菌株的菌落形态、孢子链和孢子的颜色形态，并结合生理生化实验进行了初步的分类与鉴定。围绕微山湖地区的三个划分区域样点沉积物中放线菌的群落组成以及其多样性，对其中的单个菌株的总DNA进行提取，使用放线菌的特异性引物扩增得16S rDNA基因片段，然后构建克隆文库通过酶切，选择其中携带不同带型的16S rDNA基因插入片段的阳性克隆进行测序。最后构建系统发育树并进行分析，结合分离纯化和生理生化的实验结果表明，在微山湖样品采集地的湖底淤泥中，放线菌主要分布在以下四个放线菌属：链霉菌属、诺卡氏菌属、拟诺卡氏菌属和放线杆状菌属。其中，链霉菌属主要分布在南四湖区和养殖区，诺卡氏菌属、拟诺卡氏菌属和放线杆状菌属主要分布于示范区。
　　制备21株放线菌的发酵液，对它们的抑菌活性进行测定，结果表明：同属链霉菌属的WS-3菌株和YB-3菌株对指示菌的抑制作用最明显，并且对霉菌的抑制作用尤为突出，对其他指示菌的抑制作用相对较弱，菌株YA-3、YA-6、YC-1、N A-1和N E-2对霉菌的抑制作用仅次于以上两种菌。同时发现大多数放线菌都能够抑制大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的生长，但是对枯草芽胞杆菌的抑制作用却普遍较低。对其中的WS-3菌株的产抑菌活性物质的初步条件进行了研究，结果表明该活性物质具有对pH、温度、紫外照射等的稳定性，可初步判定其不属于蛋白质类物质。

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第一章 绪论

1微山湖概况

2放线菌的研究背景

3放线菌的培养条件和菌种鉴定

第二章 湖底淤泥放线菌的分离纯化和生理生化特征

1实验材料

2实验方法

3实验结果

4小结

第三章湖底淤泥放线菌的16S rDNA序列分析

1实验材料

2 实验方法

3.实验结果

4本章小结

第四章 湖底淤泥放线菌发酵液的抗菌活性初步研究

1实验材料

2实验方法

3实验结果

4本章小结

第五章 放线菌WS-3发酵液活性物质的初步研究

1实验材料

2实验方法

3.实验结果

4本章小结

总结与展望

参考文献

致谢