基于纳米粒子的功能化技术用于细胞内小分子活性物质的检测

摘要

第一章，对相关技术背景进行了详细地介绍，比如金纳米粒子的制备及其在生物医学中的应用、DNA、肿瘤细胞标志物、电致化学发光、荧光及激光共聚焦显微镜等，了解了目前研究的现状及检测的技术水平，对自己研究的课题具有指导意义。最后介绍了本课题的研究目的及研究内容。
　　第二章，制备金纳米粒子(AuNRs)，并且以金纳米粒子作为标记物，能够和多种生物分子结合。通过对DNA的一些处理，建立了金纳米粒子的功能化核酸适体的体系来检测溶液中的ATP含量，并将此体系来与细胞结合并进一步检测细胞内ATP的含量。检测限为4.0×10-8 M浓度的ATP，并可以检测200-5000个Ramos细胞。
　　第三章，以合成的硫化镉(CdS)量子点为基础，本章设计了一个基于CdS传感器的电致化学发光法和荧光分光光度法来检测ATP的含量的方法，对ATP有快速的响应。当体系中存在ATP时，它就会和ATP适体链结合，从而释放出CdS-DNA'链，CdS在包含0.1 M KCl和0.05 M K2S2O8的PBS缓冲溶液中能够产生ECL信号，通过ECL强度的改变，确定ATP的浓度。优化实验条件后，此传感器可以对2.0×10-9-1.0×10-7M浓度范围内的ATP有响应。也可以在金片上进行修饰，就可以用于荧光的测量，对2.0×10-9-1.0×10-7 M浓度范围内的ATP同样有响应，因此此传感器在生物分析领域有着很好的应用前景。

目录

摘要

第一章 绪论

1．1 金纳米粒子简介

1．2 金纳米粒子制备方法

1．2．1 氧化还原法

1．2．2 模板法

1．2．3 光化学法

1．2．4 电化学法

1．2．5 微乳液法

1．2．6 微波法

1．3 金纳米粒子的光学性质

1．4 金纳米棒的合成、表面功能化修饰及其在生物医学中的研究

1．4．1 金纳米棒的合成

1．4．2 金纳米棒的生长机理

1．4．3 金纳米棒的表面修饰

1．4．4 金纳米棒在生物医学中的研究

1．5 DNA生物传感器

1．5．1 DNA的组成、结构及性质

1．5．2 DNA生物传感器的设计原理

1．5．3 DNA生物传感器的信号放大在生化分析中的应用

1．6 肿瘤及其危害

1．6．1 肿瘤标志物定义

1．6．2 肿瘤标志物的特点及应用

1．6．3 肿瘤标志物简介

1．6．4 三磷酸腺苷(ATP)

1．6．5 阿霉素(DOX)

1．7 电致化学发光法

1．7．1 电致化学发光的原理

1．7．2 电致化学发光反应类型

1．7．3 电致化学发光的前景

1．8 荧光简介

1．8．1 荧光产生分类

1．8．2 荧光产生原理

1．8．3 荧光应用领域

1．9 激光扫描共聚焦显微镜

1．9．1 激光共聚焦显微镜检测简介

1．9．2 激光共聚焦显微镜主要用途

1．9．3 激光共聚焦显微镜基本原理

1．10 本课题研究目的及研究内容

第二章 基于金纳米粒子的功能化适体探针用于癌细胞及细胞内ATP分子的检测和分子药物的传输

2．1 引言

2．2 实验部分

2．2．1 仪器与试剂

2．2．2 实验方法

2．3 结果与讨论

2．3．1 设计原理

2．3．2 金纳米棒的表征

2．3．3 反应时间的优化

2．3．4 细胞存活率试验

2．3．5 DOX／Au／DNA特异性

2．3．6 Ramos细胞检测

2．3．7 试管内ATP检测

2．4 小结

第三章 基于CdS传感器的电致化学发光法检测ATP

3．1 引言

3．2 实验部分

3．2．1 仪器与试剂

3．2．2 实验方法

3．3 结果与讨论

3．3．1 设计原理

3．3．2 CdS量子点的表征

3．3．3 金电极的表征

3．3．4 实验条件的优化

3．3．5 ATP的ECL检测

3．3．6 ATP的荧光检测

3．3．7 CdS传感器的稳定性

3．4 小结

结论与展望

参考文献

致谢

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