茶多酚诱导肺癌细胞凋亡及P53、bcl-2基因表达的研究

摘要

茶叶气味芬芳,是世界上仅次于水的第二大饮料.大量流行病学和实验研究表明:肺癌、皮肤癌、胃癌、乳腺癌等多种肿瘤的发生与茶叶的消费显负相关.茶多酚作为茶叶的主要有效成分,约占干重的30％,具有广泛的生物学特性和药理效应.茶多酚能诱导肿瘤细胞凋亡及抑制多种肿瘤细胞的增殖,但其具体机制尚未完全明了,可能与其调整癌基因的表达、抑制肿瘤细胞DNA的复制、阻滞肿瘤细胞的细胞周期等因素有关.深入茶多酚抗癌机理的研究,将有助于茶叶及其主要成分的药用开发和利用,为茶多酚用于临床治疗肿瘤提供理论基础.目的 探讨茶多酚在体外诱导肺腺癌SPC-Al细胞凋亡的作用及其凋亡相关基因p53、bcl-2产物表达的改变.方法 体外培养人肺腺癌SPC-Al细胞,取对数生长期细胞,调整细胞浓度至10<'5>/ml,接种至培养板继续培养24 h,分对照组及茶多酚药物组(茶多酚终浓度为50μg/ml、100μg/ml、150μg/ml、200μg/ml、250μg/ml、300μg/ml),加药后继续培养12h,24h,36h.应用透射电镜观察肺癌细胞形态学变化,应用MTT法测定茶多酚对肺癌细胞抑制作用,并应用SABC试剂盒测定p53、bcl-2蛋白表达水平的变化.结果 透射电镜可见凋亡细胞的形态学改变,线粒体空泡化、核凝聚、核固缩.MTT法显示茶多酚可抑制肺癌细胞的增殖活性,其抑制作用随时间的延长而增强,以36h抑制作用最强.在浓度50μg/m~150μg/ml范围内,抑制作用随浓度增高而增强;当浓度大于150μg/ml时,抑制作用随浓度增高反而减弱.随作用时间的延长及茶多酚浓度增大,bcl-2及突变型p53蛋白的表达逐渐减弱.结论 茶多酚抑制人肺腺癌SPC-Al细胞增殖并诱导其凋亡.诱导细胞凋亡的机制可能与其下调突变型p53及bcl-2蛋白的表达水平有关.

目录

1前言

2材料和方法

2.1材料

2.2方法

2.3统计学处理

3结果

3.1 MTT增殖检测结果

3.2形态学动态变化和透射电镜观察

3.3茶多酚对bcl-2癌基因表达的影响

3.4茶多酚对p53蛋白表达的影响

4讨论

4.1茶多酚抑制SPC-AI细胞增殖

4.2茶多酚诱导SPC-A1细胞凋亡

5小结

附图

参考文献

致谢

综述 绿茶茶多酚防癌抗癌机理研究进展

英文索引