番茄红素对氧化应激后成骨细胞的影响

摘要

目的：原发性骨质疏松症的发病率较高，病因复杂。近年研究提示由活性氧造成的氧化应激是其发病原因之一。本研究将观察抗氧化剂番茄红素对氧化应激状态成骨细胞的增殖、分化、分泌及矿化功能的影响，旨在为骨质疏松症的防治提供一定的依据。 方法：用酶消法分离、纯化SD大鼠成骨细胞。取第三代细胞，用含0.1mmol/LH2O2，10％胎牛血清的低糖DMEM培养基处理24h后造成氧化应激状态。然后随机分为四组：对照组，番茄红素10-6mol/L几组，5×10-6 mol/L组，10-5mol/L组，培养72h。(1)用MTT法检测成骨细胞增殖的情况。(2)用流式细胞仪检测各组成骨细胞增殖指数(proliferation index，PI)。(3)用pNPP法检测各组成骨细胞内碱性磷酸酶的活性。(4)用Western-blot方法研究各组成骨细胞Ⅰ型胶原的表达。(5)在各组细胞中加入含维生素C(50μg/ml)、β-甘油磷酸钠(10mmol/L)的诱导液，每三天换液一次。培养四周后分别用茜素红法和改良Von kossa法对所形成的矿化结节染色，计数，观察各组成骨细胞矿化能力。 结果：(1)各实验组成骨细胞较对照组MTT A590nm吸光值增加，p＜0.01。(2)各实验组成骨细胞的增殖指数较对照组高，p＜0.01。番茄红素5×10-6 mol/L组较10-6mol/L组细胞增殖指数大，p＜0.01。(3)各实验组成骨细胞较对照组pNPP A405nm吸光值增加，番茄红素10-5M组最大，p＜0.01。(4)Western-blot结果显示，番茄红素5×10-6 mol/L组、10-5mol/L组蛋白条带较对照组宽，颜色深，提示其Ⅰ型胶原的表达增加。(5)各实验组矿化结节数均高于对照组，p＜0.01。 结论：番茄红素促进氧化应激后成骨细胞的增殖，使细胞碱性磷酸酶和Ⅰ型胶原的表达增加，矿化能力提高。

目录

文摘

英文文摘

前言

材料和方法

结果

讨论

结论

参考文献

致谢

学位论文独创性声明及学位论文知识产权权属声明

综述

在学期间发表的论文