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青岛口岸出入境人员丙型肝炎病毒核苷酸序列分析

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引言

材料与方法

1.1标本来源

1.2主要试剂和仪器

1.3方法

结果

2.1 ELISA、胶体金法试剂条及RT-PCR方法检测HCV-RNA结果比较

2.2 RT-nested-PCR

讨论

3.1 ELISA、胶体金法及RT-PCR检测HCV结果分析

3.2 HCV基因型及其流行特征

3.3 HCV分离株的分型

结论

附录

参考文献

综述

致谢

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摘要

目的:探讨出入境人员中丙型肝炎感染的流行病学情况以及病毒的基因型。 方法:应用ELISA方法对2004-2005年在山东国际旅行保健中心体检的出入境人员进行检测,HCV抗体阳性血清标本进一步应用RT-nested-PCR方法扩增出HCV NS5B区基因片断(319bp)。通过对扩增产物的双向测序,应用DNAssist分析软件进行排列比较;通过Intemet应用http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST与Genebank中HCV各型分离株序列进行比较;并通过clustalx软件对11份测序序列及Genebank中HCV各型别代表株序列进行排列后,应用phylip3.65软件绘制系统发生树。 结果:①血清学方法共检测出42份HCV抗体阳性血清标本;②RT-nested-PCR有11例NS5B区特异性扩增片段阳性;③所得11份标本与Genebank中HCV 1b型同源,系统发生树也同样显示11份标本均为HCV 1b型。 结论:本研究首次证明经青岛口岸出入境人员中HCV流行株为1b型,为HCV流行病学、加强传染病的防治提供了理论依据。

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