应用CpG ODN防治变态反应性结膜炎的实验研究

摘要

目的:探讨局部或腹腔应用CpG ODN对小鼠实验性变态反应性结膜炎的预防治疗作用和相关机理，以期为变应性结膜炎提供新的治疗策略。 方法:鸡卵白蛋白(OVA)免疫Balb/c小鼠建立变应性结膜炎动物模型，在造模前或造模后分别应用CpG ODN滴眼或腹腔治疗，并以GpC ODN和PBS作为对照用药，观察眼部临床症状后处死动物，检测结膜组织切片中嗜酸性粒细胞和中性粒细胞的变化、血清中IgG1、IgG2a含量和淋巴细胞分泌IL-2、IL-4的水平，应用流式细胞仪对培养脾细胞的分子表达和含量进行分析。 结果:在验证CpG ODN预防作用的实验中，与GpC ODN对照组和PBS对照组比较，局部滴眼或腹腔注射应用CpG ODN，随着时间的延长可以增加血清中IgG2a和降低IgG1：IgG2a的比值，而这种变化在腹腔注射组比在眼部滴眼组持续更长时间。在验证CpG ODN的治疗作用的实验中，与GpC ODN对照组和PBS对照组比较，CpG ODN治疗组的主要指标特点为： 1.在局部滴眼或腹腔治疗途径中，结膜组织切片中嗜酸性粒细胞和中性粒细胞的数量均明显减少； 2.通过局部滴眼或腹腔治疗，血清中IgG2a的含量均增加，IgG1/IgG2a比值有不同程度的下降； 3.在局部滴眼途径中，细胞培养上清中的IL-2分泌上调，而IL-4下调，但腹腔治疗组中未引起明显变化； 4.脾细胞培养中CD4+CD25+和CD80十MHCⅡ+的细胞群所占的比例有所改变。 但无论在局部滴眼还是腹腔治疗途径中，CpG ODN治疗均不能明显改善变态反应性结膜炎的早期反应临床症状。 结论:眼部或腹腔应用CpG ODN均可以激活机体阎有免疫应答和获得性免疫应答，能够不同程度的逆转实验性变态反应性结膜炎小鼠激发阶段体内的Th2型应答，改变血清中抗体亚型，减轻结膜组织局部的晚期病理反应，对实验性变态反应性结膜炎具有潜在的预防作用和显著的治疗作用。

目录

文摘

英文文摘

声明

引言

第一章材料与方法

1.1材料

1.1.1主要实验材料及试剂

1.1.2主要试剂的配置方法

1.1.3主要仪器设备

1.2方法

1.2.1 ODN的预防作用

1.2.2 ODN的治疗作用

第二章结果

2.1变应性结膜炎动物模型的建立

2.2 ODN免疫干预的预防作用

2.2.1 ELISA检测血清中抗体IgG2a含量，IgG1：IgG2a比值

2.3 ODN免疫调节的治疗作用

2.3.1 CpG ODN对变应性结膜炎晚期反应有抑制作用，对早期症状的改善无效

2.3.2 CpG ODN对变应性结膜炎小鼠血清中IgG1和IgG2a含量的影响

2.3.3 CpG ODN治疗能上调变应性结膜炎小鼠体内Th1反应并下调Th2反应

2.3.4应用CpG ODN对CD4+及CD4+CD25+T细胞的作用

2.3.5 CpG ODN上调脾细胞表面MHC Ⅱ与CD80分子的共表达

第三章讨论

结论

参考文献

综述 CpG ODN的免疫功能与应用研究

攻读学位期间的研究成果

致谢