Synphilin-1siRNA对6-羟多巴胺诱导的帕金森病大鼠黑质SOD1、α-synuclein表达的影响

摘要

目的:观察synphilin-lsiRNA对6.羟多巴胺(6-OHDA)诱导的帕金森病(PD)动物模型黑质神经细胞synphilin-l、a-synuclein、SOD1、TH表达水平的影响，以探讨synphilin-l在PD发病机制中的作用。 方法:60只Vista大鼠随机分为4组， PD模型组(n=10)，siRNA组(n=10)，siRNA阴性对照(n=10)，假手术组(n=10)； PD模型组：立体定向法向左侧黑质以每分钟1μg的速度注入18μg/3μ16-OHDA（18μg溶于3Lμ含质量分数为0.2％抗坏血酸的生理盐水中），siRNA组：参照产品说明书，利用同样的方法向左侧黑质注入Inmol/3μl synphilin-lsiRNA2次，再向黑质注射18μg/3μl6-OHDA: siRNA阴性对照组：利用同样的方法向左侧黑质注入Inmol/3μsynphilin-1阴性对照siRNA2次，再向黑质注射18μg/3μl6-OHDA；假手术组：立体定向注入黑质3μl含质量分数为0.2％抗坏血酸生理盐水。动物每天自由饮水与进食，共21天。断头取脑制作冰冻切片和石蜡切片，用免疫组化和原位杂交检测synphilin-1、α-synuclein、SOD1及TH的表达。 结论 :synphilin-1 siRNA能够明显的阻断synphilin-1的表达，synphilin-1 siRNA能够逆转6-OHDA诱导的PD大鼠黑质TH、SOD1和α-synuclein的表达水平，提示synphilin-1 siRNA可能对6-OHDA诱导的PD大鼠黑质神经细胞损伤具有保护作用，这种保护作用可能至少部分是通过调节α-synuclein、SOD1的表达而实现的。

目录

文摘

英文文摘

声明

引言

材料和方法

1.1实验动物和主要材料

1.1.1实验动物

1.1.2主要材料(仪器和试剂)

1.2实验方法

1.2.1动物分组

1.2.2帕金森病模型的建立

1.2.3大鼠免疫组化脑组织固定

1.2.4大鼠脑组织脱水、包埋

1.2.5免疫组化检测PD大鼠黑质Synphilin-1、α-synuclein、SOD1及TH的表达

1.2.6原位杂交检测PD大鼠黑质Synphilin-1、α-synuclein、SOD1及TH mRNA的表达

1.3统计学处理

结果

2.1实验动物数量分析

2.2 Synphilin-1 siRNA对PD大鼠黑质HE染色的影响

2.3 Synphilin-1 siRNA对PD大鼠黑质Synphilin-1、α-synuclein、SOD1、TH表达的影响

2.4 Synphilin-1 siRNA对PD大鼠黑质Synphilin-1、α-synuclein、SOD1、TH mRNA表达的影响

附图

讨论

3.1. Synphilin-1在PD大鼠黑质中的表达明显增加

3.2. Synphilin-1 siRNA明显抑制PD大鼠黑质Synphilin-1的表达

3.3. Synphilin-1 siRNA对PD大鼠黑质神经细胞的保护作用

3.4. Synphilin-1 siRNA下调PD大鼠黑质α-synuclein的表达

3.5. Synphilin-1 siRNA抑制PD大鼠黑质SOD1表达的下降

结论

参考文献

综述：帕金森病相关蛋白研究进展

攻读学位期间的研究成果

致谢