骨髓基质细胞迁移机制的体外实验研究

摘要

目的：观察体外条件下趋化因子CXCL-8、CXCL-16对大鼠骨髓基质细胞迁移的趋化作用。 方法：采用全骨髓法培养成年Wistar大鼠骨髓基质细胞，取第5代骨髓基质细胞行流式细胞仪鉴定；然后通过细胞免疫荧光及RT-PCR的方法检测骨髓基质细胞表达趋化因子受体CXCR1、CXCR6的情况，利用Transwell小室法探讨趋化因子CXCL-8、CXCL-16对骨髓基质细胞的体外趋化作用及其特异性。 结果：第5代骨髓基质细胞的表面抗原CD29的阳性率为99.18％， CD45的阳性率为4.35％；骨髓基质细胞趋化因子受体CXCR1和CXCR6呈阳性表达，位于细胞膜和细胞浆中，RT-PCR琼脂糖凝胶电泳后分别出现215 bp、342bp特异性扩增条带。与对照组比较，加入5~500 ng/ml趋化因子CXCL-8或CXCL-16后，骨髓基质细胞迁移数均明显增加(P<0.05)。加入抗CXCR1或CXCR6多克隆抗体后，骨髓基质细胞迁移数较250 ng/ml趋化因子CXCL-8和CXCL-16组明显减少(P<0.05)。 结论：体外条件下趋化因子CXCL-8、CXCL-16在5~500 ng/ml质量浓度范围可趋化骨髓基质细胞迁移，封闭趋化因子受体CXCR1或CXCR6后其趋化迁移作用明显减弱。CXCL-8\CXCR1和CXCL-16\CXCR6通路参与骨髓基质细胞体外迁移，为进一步研究骨髓基质细胞的迁移机制提供了理论依据。

目录

文摘

英文文摘

声明

引言

第一章材料和方法

1.1实验动物

1.2试剂和仪器设备

1.3实验方法

1.4大鼠骨髓基质细胞体外趋化实验

1.5统计学处理

第二章结果

2.1 MSCs的体外培养及形态观察

2.2 MSCs流式细胞仪鉴定

2.3 MSCs趋化因子受体表达情况的免疫荧光及RT-PCR鉴定

2.4趋化因子对骨髓间充质干细胞体外趋化迁移作用及其特异性检测

附图

第三章 讨论

3.1骨髓基质细胞的体外培养及鉴定

3.2趋化因子及其受体的分类、作用

3.3骨髓基质细胞定向迁移的特性

3.4骨髓基质细胞趋化因子受体的表达及体外趋化迁移

结论

参考文献

综述 骨髓基质细胞迁移机制研究的进展

攻读学位期间的研究成果

致谢