p-糖蛋白在人白血病多药耐药细胞株K562/A02线粒体上表达的研究

摘要

目的：P-糖蛋白(P-gp)是导致肿瘤多药耐药(MDR)的外泵通道蛋白，它在白血病多药耐药细胞株K562/A02细胞膜上过表达。目前一些研究致力于细胞内p糖蛋白的表达，这主要是为了探讨p糖蛋白在胞浆内分布与多药耐药的关系。线粒体被认为是细胞内药物储存库，可能与线粒体表面P-gp的表达有关。本研究通过观察P-糖蛋白在人白血病多药耐药细胞株K562/A02线粒体上表达的情况，来进一步探讨P-gp介导的耐药机制。
　　 方法：采用MTT法检测K562和K562/A02细胞对表阿霉素(ADM)的敏感性，运用Solarbio线粒体提取试剂盒法从K562和K562/A02细胞中提取高纯度的活线粒体，使用多个结合不同P-gp表位的单抗在流式细胞仪上检测细胞总的、细胞膜以及线粒体上P-gp的表达情况，采用Western Blot技术分析细胞总的以及线粒体上P-gp的表达情况。
　　 结果：ADM对K562和K562/A02细胞具有生长抑制作用，且有剂量依赖性，半数抑制率(IC50值)分别为2.40μg/mL和75.22μg/mL，对K562细胞的抑制作用明显强于K562/A02细胞，K562/A02细胞IC50值较K562/A02细胞增加31倍以上。K562和K562/A02细胞中均有P-gp的表达，且两种细胞中总P-gp的表达量均明显高于其细胞膜表面P-gp的表达量(P<0.01)，但P-gp在K562细胞膜和线粒体膜上的表达量极低，而在K562/A02细胞膜和线粒体膜上P-gp呈高表达状态(P<0.05)。
　　 结论：P-gp在人白血病多药耐药细胞株K562/A02线粒体上过表达，可能在细胞多药耐药发生机制中起一定作用。