基质金属蛋白酶-3基因Lys45Glu多态性与缺血性卒中亚型的相关性

摘要

目的:探讨基质金属蛋白酶-3(matrix metalloproteinase-3，MMP-3)血浆水平及其基因外显子2中Lys45Glu(rs679620)多态性与缺血性卒中(ischemic stroke，IS)及其TOAST亚型的关系。
　　 方法:纳入根据TOAST病因学分型分为大动脉粥样硬化型卒中(Large arteryatherosclerotic stroke，LAA)和小动脉闭塞型卒中(Small artery occlusion stroke，SAO)患者（缺血性卒中组）233例和健康体检者（对照组）200例。采用酶联免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）检测血浆MMP-3水平，多聚酶链反应-限制性片段长度多态性方法(Polymerase Chain Reaction-RestrictionFragment Length Polymorphism，PCR-RFLP)检测MMP-3 Lys45Glu基因型。
　　 结果:缺血性卒中组患者急性期血浆MMP-3水平显著高于对照组[(253.99±75.02)ng/ml对(196.38±78.17) ng/ml，t=7.813，P=0.000]; LAA组血浆MMP-3水平显著高于SAO组(P=0.008)和对照组(P=0.000)，SAO组也显著高于对照组(P=0.000)。多变量Logistic回归分析显示，血浆MMP-3水平增高可能是IS的独立危险因素(OR=1.012，95％CI:1.008-1.015，P=0.000)。IS组MMP-3基因Lys45Glu基因型频率及等位基因频率与对照组均无显著差异(x2=2.085，P=0.353;x2=2.290，P=0.130)。LAA、SAO和对照组之间基因型频率差异有统计学意义(x2=10.39，P=0.034)，其中LAA组AA+GA基因型频率显著高于SAO组(x2=5.375，P=0.020)和对照组（x24.84，P=0.028）;3组间等位基因频率无显著差别(x2=3.887，P=0.143)。多变量Logistic回归分析显示，Lys45Glu多态性可能是LAA的独立危险因素(OR=1.783，95％CI:1.183-2.688，P=0.006)。AA、GA和GG基因型患者血浆MMP-3水平存在显著差异(F=9.682，P=0.000);AA+GA基因型患者较6G基因型患者血浆MMP-3水平明显增高，差异有统计学意义[(241.71±81.73)ng/ml对(207.98±77.61) ng/ml, t=4.336, P=0.000]。
　　 结论:LAA和SAO患者血浆MMP-3水平增高，以LAA亚型升高最为显著;MMP-3基因Lys45Glu多态性可能与MMP-3血浆水平及LAA的发生有关。

目录

摘要

引言

第一章 研究对象和方法

1．1 研究对象

1．1．1 病例组

1．1．2 对照组

1．1．3 研究对象的资料收集

1．2 仪器、材料与试验试剂

1．2．1 主要仪器

1．2．2 主要试剂

1．3 试验方法

1．3．1 血液标本采集

1．3．2 血浆MMP-3浓度测定

1．3．3 基因组DNA的提取

1．3．4 测定提取DNA的OD值

1．3．5 引物设计与合成

1．3．6 PER扩增

1．3．7 PER反应后电泳结果

1．3．8 限制性内切酶酶切反应

1．4 统计学方法

第二章 结果

2．1 基因型电泳和测序结果

2．2 研究对象的人口学特征和临床资料比较

2．3 血浆MMP-3水平与IS的相关性

2．4 基因型及等位基因频率比较

2．5 不同基因型患者的血浆MMP-3水平比较

第三章 讨论

结论

参考文献

综述

攻读学位期间的研究成果

致谢

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