颈动脉联合全身低温对短暂性全脑缺血大鼠ICAM-1表达及神经功能的影响

摘要

目的:探讨经颈动脉灌注冷生理盐水联合体表降温对全脑缺血大鼠神经功能及炎症反应的影响
　　 方法:健康雄性SD大鼠120只，月龄2～3个月，体重220～260g，采用随机数字表法，将其随机分为大鼠随机分为4组:假手术组(S组)仅分离双侧颈总动脉;缺血再灌注组（IR组）采用四血管阻断法制备大鼠全脑缺血15min再灌注模型、脑缺血15min再灌注后全身亚低温组（H组）:于再灌注即刻向大鼠全身喷洒酒精行体表降温，维持直肠温度32～34℃3h、脑缺血后经颈动脉联合体表降温组（CH组）:全脑缺血之后即刻经颈动脉灌注9ml20℃的生理盐水按照0.9ml/min的速度灌注，同时联合大鼠全身喷洒酒精使其鼓膜温度维持亚低温(32-34℃)3h，S组24只，其余每组32只。每组分别于再灌注6、12、24、48h时每组随机抽取8只大鼠，进行神经功能缺陷评分(NDS)，并采用ELISA法测定各组血清中血清细胞间粘附分子-1（ICAM-1）和白细胞介素1β（IL-1β）的浓度。每组每时点抽取4只采用Westernblotting方法测定脑组织ICAM-1，4只HE染色法计数海马存活神经元数目。
　　 结果: CH组达亚低温时间(4.57±0.44)min较H组(36.67±3.27) min明显缩短(P＜0.01);与S组相比较， IR组各个时间点神经功能评分低，H组和CH组较IR组评分高，CH组较H组各个时间点评分高且差异具有统计学意义(p＜0.05);与S组相比， H组和IR组在再灌注各时点海马存活神经元计数降(低，)H组和CH组在再灌注各时间点时海马存活神经元计数升高，CH组更明显;与S组比较，其余各组各个时间点ICAM-1、IL-1β浓度明显升高，H组和CH组各个时间点其浓度分别较IR组低(P＜0.05);而CH组各个时间点与H组比较差异无显著性(P＞0.05);与S组相比较，其余各组IR组在再灌注6、12、24、48h时脑组织ICAM-1表达上调(P＜0.05)，与IR组相比较，H组、CH组在再灌注个时间点ICAM-1表达降低(P＜0.01)，而CH组较H组更低(P＜0.05)。
　　 结论:全脑缺血再灌注后6h，IL-1β、ICAM-1血清浓度明显升高，24h达到高峰，至48h水平趋于平缓，说明IL-1β、ICAM-1确实参与了全脑缺血损害过程;而降温处理对全脑缺血再灌注损伤后炎症反应有显著抑制作用;脑组织ICAM-1检测证实经颈动脉联合体表降温组ICAM-1的表达量最低，神经缺陷功能评分最高，神经保护效果也更好。

目录

摘要

引言

第一章 材料与方法

1．1 实验动物与分组

1．2 药品和试剂

1．3 仪器设备

1．4 试验方法

1．4．1 全脑缺血模型的建立

1．4．2 神经行为学评分

1．4．3 血清ICAM-1、IL-1β测定

1．4．4 HE染色

1．4．5 Western blotting

1．5 统计学处理

第二章 结果

2．1 H组和CH组达亚低温时间比较

2．2 神经功能缺陷评分

2．3 HE染色

2．4 血清炎症因子的浓度变化

2．5 Western-blot检测

第三章 讨论

3．1 脑缺血再灌注时ICAM-1与多种细胞因子的作用

3．2 亚低温对脑缺血再灌注损伤后ICAM-1的影响

3．3 亚低温的方法

3．4 结论

参考文献

综述

攻读学位期间的研究成果

致谢

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