环磷酰胺对大鼠坐骨神经损伤后修复及神经生长因子表达的实验研究

摘要

目的:观察环磷酰胺对大鼠坐骨神经损伤后神经生长因子表达的影响，评价环磷酰胺对大鼠神经损伤后神经修复情况，进一步探讨环磷酰胺对周围神经损伤后神经再生的机制，为指导临床周围神经损伤的治疗提供有效的实验依据。
　　 方法:雄性Wistar大鼠72只，随机分为假手术组、生理盐水对照组和环磷酰胺实验组，每组24只，后两组均分离出右侧坐骨神经后并离断，然后行神经外膜端端吻合，假手术组仅游离出坐骨神经，然后缝合切口。术后即日起，环磷酰胺组腹腔注射免疫抑制剂环磷酰胺(15mg/kg.d)连续2周，生理盐水组腹腔注射等体积生理盐水连续2周，假手术组不做任何处理。各组分别于给药后1、2、4、8周采用大鼠坐骨神经功能指数、腓肠肌湿重恢复率及组织切片形态学观察来评价坐骨神经损伤修复情况，并于各时间点取术侧坐骨神经采用SABC免疫组化的方法分析NGF表达的变化。
　　 结果:(1)神经再生评价:给药后4，8周时环磷酰胺组坐骨神经功能指数，腓肠肌湿重恢复率结果均优于生理盐水对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)。组织形态学观察，给药后4，8周环磷酰胺组再生神经轴突直径、数量明显多于采用生理盐水对照的生理盐水对照组。(2)免疫组化结果:假手术组坐骨神经内无NGF阳性表达。环磷酰胺组给药后1、2、4周坐骨神经内NGF阳性表达量高于生理盐水对照组，差异有显著性(t=2.32，2.74，2.43，3.67，p＜0.05)，且两组在各时间段组内比较差异有统计学意义(F=111.94，q=4.53～31.20，p＜0.05)。
　　 结论:环磷酰胺对周围神经损伤后神经再生有促进作用，并可以增加大鼠坐骨神经损伤后NGF的表达来促进神经再生。

目录

摘要

引言

第一章 材料和方法

1．1 实验动物

1．2 动物模型建立

1．3 主要实验仪器

1．4 主要实验试剂

1．5 主要实验方法

1．5．1 大鼠坐骨神经功能指数(SFI)

1．5．2 坐骨神经取材及石蜡包埋

1．5．3 双侧腓肠肌湿重称重

1．5．4 HE染色及免疫组织化学标本制备

1．5．5 HE染色步骤

1．5．6 免疫组化染色步骤

1．5．7 HE染色及免疫组化染色结果观察

1．6 统计学处理

第二章 结果

2．1 大鼠术后大体观察

2．2 坐骨神经功能指数

2．3 腓肠肌湿重恢复率

2．4 HE染色结果观察

2．5 NGF免疫组织化学结果

第三章 讨论

结论

参考文献

综述

攻读学位期间发表的论文

致谢

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