负载胶质瘤干细胞抗原的树突状细胞对脑胶质瘤治疗作用的研究

摘要

目的:体外培养大鼠C6细胞，从中分离、培养与鉴定胶质瘤干细胞，比较普通胶质瘤细胞及胶质瘤干细胞的致瘤性;由大鼠骨髓提取单核细胞诱导分化为树突细胞，分别用胶质瘤细胞、胶质瘤干细胞全细胞抗原致敏树突细胞制备疫苗;构建大鼠脑胶质瘤模型，经尾静脉分别注射两种树突细胞疫苗，观察大鼠生存情况并分析。
　　方法:体外常规培养C6细胞，取对数生长期细胞于无血清干细胞培养基中诱导培养脑胶质瘤干细胞，有限稀释法观察其增殖能力，并对其进行鉴定。分别将C6及胶质瘤干细胞接种于大鼠皮下，行PET-CT检查比较其致瘤性;提取大鼠骨髓源性单核细胞，加入细胞因子诱导成树突状细胞并对其鉴定，分别加入C6及胶质瘤干细胞冻融抗原，制备树突细胞疫苗;利用立体定向方法建立大鼠脑胶质瘤模型，观察其生存期、生活状态，肿瘤病理特点，行MRI检查观察肿瘤生长规律;分别将两种树突细胞疫苗由尾静脉注入脑内已成瘤大鼠体内，观察比较大鼠生存期，对生存情况进行分析。
　　结果:胶质瘤干细胞在无血清培养基中呈细胞球样悬浮生长，肿瘤干细胞标志物CD133，Nestin均阳性表达，具备自我更新及增殖能力，致瘤性强于普通胶质瘤细胞;树突细胞具有典型的树突状结构，特异性表面标志物OX62高表达;立体定向法构建大鼠脑胶质瘤模型成功率高，模型生存周期稳定，病理特点与人脑胶质瘤相似;注射利用胶质瘤干细胞抗原制备树突细胞疫苗大鼠生存时间长于普通树突细胞疫苗。
　　结论:胶质瘤干细胞致敏的树突细胞较普通胶质瘤细胞致敏的树突细胞有更强的抗肿瘤效果。