人参皂苷Re改善脂代谢的作用机制研究

摘要

[目的]研究人参皂苷Re对db/db小鼠脂代谢的影响，并探寻其可能的作用机制。
　　[方法]18只雄性基因缺陷的肥胖db/db小鼠，随机分为Re处理组和对照组。适应性喂养一周后，分别予以40mg/kg的Re或等体积溶媒每日一次腹腔注射，每日定时记录小鼠的体重和摄食量。给药8周后，眼眶采集血标本，用以测定血脂含量，颈椎脱臼法处死小鼠，并快速剪取小鼠肝脏、皮下脂肪、内脏脂肪组织，称重后置于-80℃冰箱内保存备用。同时剪取部分组织放入4％的多聚甲醛固定液中固定，行石蜡包埋和HE染色，观察各组织细胞形态学变化。提取各组织RNA及蛋白质，Real-timePCR和Western-blot的方法研究脂代谢相关信号通路基因和蛋白水平的变化。
　　[结果](1)给药前两组小鼠体重无显著差异(39.194±1.151g VS39.286±0.854g，P＞0.05)，但给药第2周开始，Re处理组小鼠体重显著低于对照组(P＜0.05)，这种差异一直持续到实验结束;(2)Re处理组小鼠每日平均摄食量与对照组相比无显著差异(P＞0.05);(3)Re处理组小鼠肝脏、皮下脂肪、内脏脂肪组织重量均显著低于对照组(P＜0.05);(4)Re处理组小鼠肝脏、皮下脂肪、内脏脂肪组织重量占相应体重的比例显著低于对照组(P＜0.05);(5)Re处理组db/db小鼠血清中甘油三酯(Triglyceride TG)、总胆固醇(Total cholesterol TC)的含量显著低于对照组(P＜0.05);(6)测定肝脏组织中甘油三酯含量结果显示:Re处理组db/db小鼠肝内脂肪含量显著低于对照组(P＜0.05);(7)肝脏组织HE染色结果观察:Re处理组肝脏组织中脂肪沉积显著少于对照组;(8)皮下脂肪、内脏脂肪组织Real-time PCR结果示，Re处理组与对照组相比，MCAD、LCAD及CPT1β等与脂肪酸氧化代谢相关的多个基因mRNA水平显著上调(P＜0.05);(9)肝脏组织Real-time PCR结果示:Re处理组MCAD、LCAD及CPT1β等与脂肪酸氧化相关基因的mRNA水平较对照组显著上调(P＜0.05)，但FAS、C/EBPβ等与脂肪生成相关基因的mRNA表达水平较对照组显著下调;(10) Western-blot结果示:Re处理组小鼠肝脏组织中P-AMPK的表达水平显著上调。
　　[结论](1)Re不影响db/db小鼠的摄食，但可显著抑制其体重增加;(2) Re能显著降低db/db小鼠血清甘油三酯和胆固醇的含量;(3)Re能显著改善db/db小鼠肝脏组织脂肪的沉积;(4)Re可调控肝脏、皮下脂肪、内脏脂肪组织中与脂肪酸氧化（如MCAD、LCAD、CPT1β等）、脂肪生成（如FAS、C/EBPβ等）代谢相关基因的表达水平，并可能通过激活P-AMPK信号通路，改善机体脂代谢。