抗CD20单克隆抗体与IL-10联合应用对NOD小鼠脾脏免疫功能影响

摘要

目的：观察抗 CD20单克隆抗体（Anti-CD20）和腺病毒介导的白细胞介素10基因（Ad-IL-10）联合应用对非肥胖型糖尿病（NOD）小鼠脾脏免疫功能的影响。
　　方法：24只未发病3-4周龄雌性NOD小鼠随机分为A、B、C、D组各6只：A组为抗CD20单抗单独治疗组（Anti-CD20组）、B组为抗CD20单抗与IL-10基因联合治疗组（Anti-CD20+IL-10组）、C组为IL-10基因单独治疗组（IL-10组）、D组为生理盐水对照组（Normal control，NC）。A、B组首次分别尾静脉注射Anti-CD200.5㎎，以后第3天、6天、9天分别给予0.25㎎；B、C组第1天、3天、6天、9天分别静脉注射IL-10基因0.1ml，D组注射生理盐水0.1ml。全部小鼠自由饮食，每周监测小鼠尾静脉血糖2次，首次用药12w后，断颈处死，立即取出脾脏，免疫组化检测脾脏CD3+T cell、CD4+T cell数量及IL-10、IL-27表达水平。
　　结果：与D组比较，A、B、C组脾脏组织中CD3+T细胞、CD4+T细胞数量及IL-27、IL-10表达增加（P均＜0.01）；与A、C组比较，B组脾脏组织中CD3+T细胞、CD4+T细胞数量及IL-10、IL-27表达增加（P均＜0.01）。
　　结论：Anti-CD20与IL-10联合应用可增加NOD小鼠脾脏组织中CD3+T细胞、CD4+T细胞数量及IL-10、IL-27表达，从而调节机体免疫微环境。

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引言

第一章 材料与方法

1 .1 材料

1.1.1实验动物

1.1.2细胞及病毒：

1 .2主要仪器

1.2.1 常用仪器

1.2.2 细胞培养、重组腺病毒扩增和滴度测定

1 .3主要试剂、耗材

1.3.1细胞培养

1.3.2动物实验

1.3.3免疫组化

1 .4 方法

1.4.1重组腺病毒载体及病毒扩增

1.4.2重组腺病毒滴度测定

1.4.3动物分组与处理

1.4.4标本采集

1.4.5血糖测定

1.4.6免疫组化

1.4.7主要观察指标

1 .5 数据统计

第二章 结果

2 .1 腺病毒扩增及其滴度测定

2 .2各组间血糖的动态变化比较

2 .3免疫组化检测小鼠脾脏CD 3+T、CD 4+T细胞数量及IL-10和I L-27表达水平

2.3.1各组NOD小鼠脾脏CD3+T细胞数量比较

2.3.2各组NOD小鼠脾脏组织中CD4+T细胞数量比较

2.3.3各组小鼠脾脏组织中IL-10表达水平比较

2.2.4各组NOD小鼠脾脏组织中IL-27表达水平比较

第三章 讨论

第四章 结论

参考文献

综述: CD分子与糖尿病关系研究进展

攻读学位期间的研究成果

致谢

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