中枢nesfatin-1通过交感神经调节外周脂肪代谢

摘要

目的：研究中枢nesfatin-1对糖尿病小鼠外周脂肪动代谢调节作用；同时，通过药物阻断交感神经对白色脂肪组织和骨骼肌的支配，探究中枢nesfatin-1参与外周脂肪代谢调节的分子机制。
　　方法：将实验小鼠给予高脂饮食和2次小剂量链脲佐菌素（STZ）诱导成为2型糖尿病小鼠，然后进行侧脑室置管术。根据侧脑室注射药物不同设生理盐水对照组和nesfatin-1实验组两大组，每组中枢给药前30min分别腹腔给予α受体阻断剂组（酚妥拉明）、β受体阻断剂（普萘洛尔）和生理盐水。监测中枢给药1小时内每组血糖变化，检测血浆中胰岛素含量和游离脂肪酸（FFA）水平；分别使用Real Time PCR法和Western Blot法从基因和蛋白水平分别检测各组白色脂肪组织中脂肪动员相关酶类（HSL、ATGL）和骨骼肌组织中脂肪酸β氧化相关酶类（AMPK-ACC-CPT1）的变化。
　　结果：中枢nesfatin-1对外周血糖没有显著影响；与生理盐水组比较，中枢注射nesfatin-1组血浆游离脂肪酸显著降低（p<0.05），给予β受体阻断剂后，游离脂肪酸水平升高（p<0.05）；Nesfatin-1组脂肪动员相关酶类p-HSL和ATGL的蛋白和基因水平都显著升高（p<0.05），而给予β受体阻断剂普萘洛尔后，HSL和ATGL的基因水平显著下降（p<0.05），p-HSL蛋白水平明显下降（p<0.05）；Nesfatin-1实验组与生理盐水对照组比较，骨骼肌脂肪酸β氧化相关酶类（AMPK、ACC）磷酸化蛋白和基因水平表达升高（p<0.05），提前给予α阻断剂酚妥拉明后，其蛋白和基因水平表达都明显下降（p<0.05）。
　　结论：中枢注射nesfatin-1通过交感神经调节外周脂肪动员和脂肪酸β氧化。

目录

封面

中文摘要

英文摘要

目录

引言

第一章 材料和方法

1.1实验材料

1.1.1 实验动物

1.1.2 主要仪器

1.1.3主要试剂及耗材

1.1.4 主要试剂配制

1.2 主要实验方法

1.2.1 2型糖尿病小鼠模型的建立

1.2.2 侧脑室置管术

1.2.3 实验分组

1.2.4 荧光定量 PCR法检测HSL、ATGL、AMPK、ACC的基因水平表达。

1.2.5 Western blot 检测HSL、ATGL、AMPK、ACC的蛋白水平表达。

1.2.6 ELISA法检测血浆中游离脂肪酸水平。

1.2.7 统计学分析

第二章 结果

2.1 2型糖尿病小鼠模型

2.2 中枢nesfatin-1对2型糖尿病小鼠脂肪代谢的影响

2.2.1 各组2型糖尿病小鼠血糖和胰岛素变化

2.2.2 各组2型糖尿病小鼠血浆游离脂肪酸含量变化

2.3 中枢nesfatin-1对2型糖尿病小鼠脂肪动员相关酶类的影响

2.3.1 中枢nesfatin-1对2型糖尿病小鼠激素敏感性酯酶（HSL）蛋白和基因水平的影响

2.3.2中枢nesfatin-1对2型糖尿病小鼠甘油三酯脂肪酶（ATGL）蛋白和基因水平的影响

2.4 中枢nesfatin-1对2型糖尿病小鼠β脂肪酸氧化相关酶类的影响

2.4.1 中枢nesfatin-1对2型糖尿病小鼠骨骼肌AMPK蛋白和基因水平的影响。

2.4.2中枢nesfatin-1对2型糖尿病小鼠骨骼肌ACC蛋白和基因水平的影响。

第三章 讨论

结论

参考文献

综述:肥胖和糖尿病相关脂肪因子研究进展

攻读学位期间的研究成果

致谢

声明