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高血压与ApoE基因多态性、T细胞亚群及细胞因子异常的相关性探索

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引言

技术路线

材料与方法

1 .1主要仪器及试剂

1. 2临床资料

1 .3实验方法

1 .4统计学方法

结果

2.1 IL-6检测结果比较

2.2 IL-17检测结果比较

2.3 IL-10检测结果比较

2.4 TNF-α检测结果比较

2.5观察组不同髙血压患者治疗后IL-6、IL-17、IL-10和TNF-α的检测结果比较

2.6流式细胞仪检测外周血T细胞亚群及Th17细胞占CD4+细胞的比例

2.7 ApoE基因型的检测结果

讨论

3.1 IL-6与髙血压之间的联系

3.2 IL-17与髙血压之间的联系

3.3 IL-10与髙血压之间的联系

3.4 TNF-α与髙血压的关联性

3.5 T细胞亚群和髙血压之间的相关性

3.6ApoE基因和髙血压之间的关联性

结论

参考文献

综述: 髙血压病分子免疫研究新进展

攻读学位期间的研究成果

致谢

声明

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摘要

目的:
  本研究旨在通过观测患者T淋巴细胞亚群及血清IL一6、IL一17、肿瘤坏死因子(TNF—α)和IL一10细胞因子水平及ApoE基因多态性,以证实其与高血压病的相关性,为高血压病的分子免疫机制提供依据。
  方法:
  针对文登整骨医院内科2013年6月到2014年12月所收集的经治的60例高血压病患者作为研究对象,其中单纯原发性高血压病患者20例、合并糖尿病者20例及合并冠心病者20例患者列为实验组,另外选择60例文登整骨医院体检的健康志愿者作为对照组;清晨采集外周静脉血3mL作为样本,室温下离心取得血清后在-20℃下保存,直到所有样本收集完成后同时进行检测操作,采用抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)分别对IL-6、IL-17、肿瘤坏死因(TNF—α)和IL-10进行检测,样本均经双管检测并取均值。采取流式细胞仪法检测原发性高血压病患者T淋巴细胞亚群的变化情况。采用PCR扩增ApoE基因,通过电泳得到各组ApoE基因的表型。比较上述指标在两组之间的数据差异,并采用统计学软件进行处理分析。
  结果:
  结果显示正常对照组健康体检者的IL-6含量为8.46±2.18pg/mL,而高血压观察组的IL-6检测平均值为21.43±4.52pg/mL,高血压观察组的IL-6明显高于对照组,两组之间比较存在显著性差异(P<0.05)。正常对照组健康体检者的IL-17检测平均值为52.21±19.61pg/mL,而高血压观察组的IL-17检测平均值为103.31±24.72pg/mL,两组比较存在着显著性差异(P<0.05)。正常对照组健康体检者的TNF-α检测平均值为0.65±0.17μg/L,而高血压观察组的TNF- a检测平均值为1.28±0.56yg/L,高血压观察组的TNF-a明显高于对照组,两组比较具有显著性差异(P<0.05)。正常对照组健康体检者的IL-10检测平均值为27.56±8.92pg/mL,而高血压观察组的IL-10检测平均值为10.36±5.33pg/mL,观察组明显低于对照组,两组比较具有显著性差异(P<0.05)。在观察组中,原发性高血压、合并糖尿病和合并冠心病三种不同类型的患者在IL-6、IL-17、TNF-a的治疗后检测,上述细胞因子降低,但是这种差异无统计学意义(P>0.05),IL-10治疗后检测呈现出明显上升,差异有显著性(P<0.05)。患者在治疗后,T淋巴细胞亚群的数量有明显的增长,其差异性具有统计学意义(P<0.05)。与健康组相比,ApoE4/4基因型和其4等位基因频率在原发性高血压患者中明显增加,提示其4与原发性高血压相关,可能是高血压相关的遗传因素之一。
  结论:
  单纯原发性高血压病患者;合并糖尿病的患者;合并冠心病的患者IL-6、IL-17、TNF-α均高于正常人群,而IL-10低于正常人群。高血压观察组⑶4+细胞明显增多,CD4/CD8比例失衡,Th17细胞及其相关细胞因子明显增高,治疗后都有所下降。ApoE4/4基因型和其4等位基因多态性与原发性高血压相关。由此证明高血压是由免疫因素和遗传因素共同导致的免疫遗传性疾病,这种基因、分子及细胞水平的变化在高血压的发展过程中起着非常重要的作用。同时也可以作为高血压疾病诊断的参考指标。对于高血压的病情的发展和控制具有重要的指导价值。

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