低剂量辐射通过下调ERCC1和Bcl-2增强耐药卵巢癌细胞对顺铂的敏感性

摘要

目的：卵巢癌是所有女性恶性肿瘤中容易引起死亡的疾病。而卵巢癌的主要治疗方法是手术治疗加上术后的多药联合化疗，其中铂类是多药联合化疗中的基础药物。然而对于卵巢癌来说，其主要的挑战来自癌细胞对于化疗药物抵抗性的发生。所以本试验的目的在于证实低剂量辐射有增强耐药卵巢癌细胞化疗敏感性的作用，并探究其机制，然后为耐药性卵巢癌的临床治疗提供新的策略。
　　方法：CCK8法检测细胞增殖。采用流式细胞仪（FCM）的方法，通过Annexin V-FITC和PI的双染色来量化耐顺铂卵巢癌细胞（SKOV3/DDP）的凋亡率。实时荧光定量PCR（qPCR）分析SKOV3/DDP细胞中ERCC1和Bcl-2的mRNA表达水平。
　　结果：对照组，常规剂量组和低剂量组的IC50值分别为9.367±0.16,9.289±0.16和3.847±0.15分别（P<0.05）。经过流式细胞仪检测，低剂量辐射组较其他组具有更显著的凋亡率（p<0.05）。低剂量组的ERCC1和Bcl-2的mRNA相对表达量比对照组及常规剂量组显著降低（p<0.05）。
　　结论：低剂量辐射具有增加SKOV3/DDP细胞对化疗药物（顺铂）敏感性的作用，而其这一作用可能是通过减弱SKOV3/DDP细胞的DNA损伤修复能力和加强肿瘤细胞的凋亡来实现的。

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引言

第一章 实验材料

1.1 细胞株

1.2 实验仪器

1.3 实验试剂及药品

1.4 主要液体配置

第二章 实验方法与步骤

2.1 细胞培养

2.1.1 细胞换液

2.1.2 细胞传代

2.1.3 细胞冻存

2.1.4 细胞复苏

2.1.5 细胞计数

2.2 细胞的体外照射

2.3 CCK8法检测细胞的增殖抑制率

2.4流式细胞仪检测细胞凋亡率

2.5 qPCR法检测ERCC1及Bcl-2基因 mRNA的表达

2.5.1 提取样本总RNA

2.5.2 反转录

2.5.3 Real-Time PCR

2.6 统计学方法

第三章 实验结果

3.1 低剂量照射对SKOV3/DDP细胞增殖抑制率的影响

3.2 低剂量照射对SKOV3/DDP细胞凋亡率的影响

3.3 低剂量照射对ERCC1及Bcl-2基因mRNA的表达的影响

第四章 讨论

第五章 结论

参考文献

综述:低剂量照射及耐顺铂卵巢癌细胞（SKOV3/DDP）耐药性的研究进展

攻读学位期间的研究成果

致谢

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