侧脑室注射orexin-A对大鼠昼夜摄食影响研究

摘要

目的：探讨侧脑室注射orexin-A对大鼠昼夜摄食的影响。
　　方法：成年雄性Wistar大鼠侧脑室（前囟后1.0mm，旁开1.5mm，颅骨表面下4mm）埋置套管，将Wistar大鼠随机分为三大部分，分别给予单次侧脑室注射、连续侧脑室注射和外周注射。单次侧脑室注射大鼠随机分为8:00 Am侧脑室注射2.5 nmol/10μL Orexin-A，8:00Am侧脑室微量注射7.2 nmol/10μL Orexin-A，8:00Am侧脑室微量注射24.5 nmol/10μL Orexin-A，8:00Am侧脑室微量注射10μL NS，18:00侧脑室微量注射24.5 nmol/10μL Orexin-A，18:00侧脑室微量注射10μL NS，24:00侧脑室微量注射24.5 nmol/10μL Orexin-A，24:00侧脑室微量注射10μL NS，8:00Am侧脑室注射 Orexin-A+侧脑室微量注射24.5 nmol/10μL Orexin-A，8:00Am侧脑室注射 Orexin-A+侧脑室微量注射10μL NS。连续侧脑室注射大鼠随机分为侧脑室微量注射18 nmol/10μL Orexin-A及侧脑室微量注射10μL NS，于每日上午8:00和下午15:00给药，连续给药8天，外周给药大鼠分为尾静脉注射5 mg/kg/200μL Orexin-A，尾静脉注射200μL N S，皮下注射18 nmol/50μL orexin-A，皮下注射50μL NS，连续注射8天，在给药期间给予各组大鼠充足的饮食和水，观察测量大鼠24小时内各阶段的摄食量以及相应生化指标，并比较其差异。
　　结果：上午8:00侧脑室微量注射 Orexin-A，给药后1 h时，只有注射7.2 nmol Orexin-A组和24.5 nmol Orexin-A组大鼠摄食量显著增加（P＜0.05），而给药后的2 h和4 h时，各组大鼠的摄食量均增加（P＜0.05），且呈显著剂量依赖关系（P＜0.05~0.01）。与NS对照组相比，下午6:00侧脑室微量注射24.5 nmol Orexin-A，大鼠在各时间点的食物摄入量均无显著改变（P＞0.05）；与NS对照组相比，在夜间24:00侧脑室微量注射24.5 nmol Orexin-A，注射后4小时内大鼠摄食量显著高于（P＜0.05）；但注药4h之后，该差异消失（P＞0.05）。在上午8:00，侧脑室微量注射24.5 nmol orexin-A，大鼠24小时总食物摄入量无显著改变（P＞0.05）；与 NS组相比，侧脑室微量注射Orexin-A后的4小时内，大鼠食物摄入量增加（P＜0.05），在随后的8小时内大鼠食物摄入量显著降低（P＜0.05）。与NS对照组相比，连续侧脑室微量注射Orexin-A（18 nmol/day）的第2天，大鼠24小时累计食物摄入量无显著差异（P＞0.05）；但Orexin-A可使大鼠光照期（08:00-18:00）的摄食量显著增加（P＜0.05），而夜间（18:00-08:00）摄食量明显减少（P＜0.05）。与NS对照组比较，在连续侧脑室微量注射Orexin-A的第8天，大鼠24小时累计食物摄入量显著降低（P＜0.05），但 Orexin-A可使大鼠光照期（08:00-18:00）摄食量显著增加（P＜0.05），黑暗期（18:00-08:00）摄食量明显减少（P＜0.05）。但连续侧脑室微量注射Orexin-A8天后，大鼠体重、脂肪垫重量（肾周和附睾）和棕色脂肪组织温度均无显著改变（P＞0.05），血糖、血浆瘦素、胰岛素、皮质酮和醛固酮水平也无显著改变（P＞0.05）。与NS对照组相比，大鼠尾静脉注射5 mg/kg orexin-A，大鼠注射后1h、2h、4h和24h摄食量均无显著改变。与NS对照组相比，连续8日皮下注射18 nmol/10μL orexin-A，给药前和给药后第5日和第8日大鼠摄食量均无显著变化。
　　结论:中枢微量注射orexin-A对大鼠摄食的调控具有昼夜节律性，而外周注射orexin-A对大鼠摄食的调控不具有昼夜节律性。

目录

引言

材料与方法

1实验材料

1. 1 实验动物

1. 2 主要实验试剂

1. 3 主要实验仪器

2侧脑室埋管

3 实验分组

3. 1 单次侧脑室注射

3. 2 连续侧脑室注射

3. 3 外周给药

4 统计分析

实验结果

1不同时间段侧脑室单次微量注射Orexin-A对大鼠摄食量的影响

2 连续侧脑室微量注射orexin-A对大鼠摄食量的影响

3 尾静脉注射Orexin-A对大鼠摄食量的影响

讨论

结论

参考文献

综述:Orexins在脑肠轴摄食调控中的作用

攻读学位期间研究成果

致谢

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