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【6h】

绝经期女性泌尿道菌群特征及与尿路感染关系的研究

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目录

引言

材料与方法

1研究对象

1.1入选标准

1.2 排除标准

1.3 伦理法规

2实验材料

2.1 主要实验仪器

2.2 所需试剂

2.3所需溶液

3实验方法和步骤

3.1 样本收集

3.2 尿液样本基因组DNA提取

3.3 PCR扩增16SrRNA基因的V4可变区的序列

3.6 测序数据的统计、处理和分类

结果

1两组尿液样本测序结果

2两组研究对象尿液菌群的比较

讨论

结论

参考文献

综述:绝经期女性尿路感染与泌尿生殖道菌群的关系及非培养诊断方式

攻读学位期间的研究成果

致谢

声明

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摘要

目的:
  通过16S rRNA基因高通量测序的非培养检测方法,研究伴有尿路感染症状的绝经期女性和健康绝经期女之间泌尿道细菌结构的差异。
  方法:
  收集就诊于青岛大学附属医院肾病内科门诊的有尿路感染症状的绝经期女性14例,留取其尿液,将尿液样本分为两份,一份进行细菌基因组DNA提取,应用16S rRNA高通量测序的方法检测尿液样本中细菌的种类;另外一份送至细菌室进行尿培养检查。收集同时期于青岛大学附属医院体检中心健康体检的绝经期女性,共14例,留取其尿液,同样进行细菌基因组DNA提取及16S rRNA测序。分析两组女性的泌尿道细菌结构之间差异。
  结果:
  (1)测序结果显示两组女性的尿液菌群构成均呈多样化,但个体差异较明显。在所有的尿液样本中,共检测出385个属的细菌类型,平均每个尿液样本包含25个属的细菌。其中检测到最丰富的细菌前四位分别是是厚壁菌门、放线菌门、变形菌门和拟杆菌门。在属的水平上,检测最多的前十位细菌为乳酸杆菌属、加德纳菌属、棒状杆菌属、肠杆菌科、葡萄球菌属、链球菌属、厌氧球菌属、嗜胨菌属、普氏菌属、放线菌属。
  (2)有尿路感染症状的绝经期女性尿液中加德纳菌属、气球菌属的检出率显著高于正常对照组,乳酸杆菌的检出率显著低于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。其他细菌如肠杆菌科、厌氧球菌属、放线棒菌属、放线菌属、纤毛菌属、普氏菌属、解脲寡源杆菌属等在实验组中被检测到的比例较对照组高,在对照组中比例较高的菌属有链球菌属、产黄杆菌属、嗜胨菌属、双歧杆菌属等,但因本实验样本量少等原因,以上两组的差异不具有统计学意义(P>0.05)。
  结论:
  绝经期女性的尿液菌群构成呈多样化,检测到最丰富的细菌是厚壁菌门、放线菌门、变形菌门和拟杆菌门。样本中以乳酸杆菌为优势菌的最多,其次是加德纳菌。有尿路感染症状的绝经期女性患者泌尿道菌群表现为乳酸杆菌显著减少,而加德纳菌属、气球菌数量增加。提示伴随尿路感染症状的绝经期女性泌尿道菌群结构发生了改变,可能是引起绝经期妇女尿路感染发病率升高的重要原因。

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