微生物转化法在制备α-葡萄糖苷酶抑制剂中的应用研究

摘要

该文优化了菌株D20对底物N-羟乙基葡萄糖胺和葡甲胺进行转化的条件,并研究了转化产物的目标产物的分析方法及分离纯化方法.利用微生物转化法,对化学合成制备的N-羟乙基葡萄糖胺及纯品葡甲胺进行结构改造,分别得到 6-(2-羟乙基)氨基-6-脱氧-α-L-呋喃山梨糖和6-甲氨基-6-脱氧-α-L-呋喃山梨糖两种转化产物,再分别将其进行化学还原得到出两个具有α-葡萄糖苷酶抑制剂活性的目标化合物,即N-羟乙基-1-脱氧野尻霉素和N-甲基-1-脱氧野尻霉素.

目录

前 言

1实验材料与方法

1.1实验材料

1.1.1菌种

1.1.2培养基

1.1.3微生物静息细胞

1.1.4主要药品与试剂

1.1.5仪器设备

1.2实验方法

1.2.1底物N-羟乙基葡萄糖胺的合成

1.2.2菌体培养条件

1.2.3菌体生长曲线的测定

1.2.4转化菌株氧化酶存在部位的确定

1.2.5转化底物溶液的制备

1.2.6微生物转化方法

1.2.7转化产物的检测方法

1.2.8转化产物的还原

1.2.9还原产物的检测

1.2.10还原产物的分离纯化

1.2.11还原产物的结构鉴定

1.2.12转化条件的考察

2实验结果

2.1菌体的培养条件

2.1.1斜面及摇瓶培养基

2.1.2效应剂的考察结果

2.2菌体生长曲线及产氧化酶的产生时间

2.3转化菌株氧化酶存在部位的确定结果

2.4摇瓶溶氧的考察

2.5转化产物的检测

2.6转化产物经化学还原所得目标产物的结构鉴定

2.6.1还原产物的检测

2.6.2还原产物的分离纯化

2.6.3还原产物的结构鉴定

2.7微生物转化条件的考察

2.7.1转化时间、底物及静息细胞浓度相关性的考察

2.7.2温度对转化的影响

2.7.3 pH对转化的影响

2.7.4静息细胞4℃下保藏时间的考察

2.7.5最大底物浓度的考察

2.8菌种遗传稳定性考察

2.8.1 4℃下菌种保藏期限

2.8.2菌种传代稳定性的考察

附 图

结 论

讨 论

参考文献

致 谢