IL-37通过IL-6/STAT3信号通路抑制NSCLC细胞侵袭和转移的机制研究

摘要

目的：探讨白细胞介素-37（IL-37）对非小细胞肺癌（NSCLC）侵袭和转移的影响及其可能的分子机制。 方法：以40例无手术、放疗、化疗及生物治疗史的NSCLC患者作为NSCLC组，40例健康志愿者作为健康对照组，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测两组血浆中IL-37的表达水平，并分析NSCLC组中IL-37的表达与临床病理特征的关系。体外培养人肺腺癌A549细胞，给予不同浓度重组人白细胞介素-37（rhIL-37）（浓度分别为0ng/ml、10ng/ml、100ng/ml和500ng/mL）处理细胞，采用TranswellTM实验和划痕愈合实验分别检测A549细胞侵袭和迁移能力，并选出rhIL-37的适宜刺激浓度；给予不同浓度重组人白细胞介素-6（rhIL-6）（浓度分别为0ng/ml、50ng/ml、100ng/ml和150ng/ml）处理细胞，采用TranswellTM实验和划痕愈合实验分别检测细胞侵袭和迁移能力，并选出IL-6的适宜刺激浓度；将A549细胞随机分为四组（对照组、IL-6组、IL-37组及IL-6+IL-37组），IL-6组和IL-6+IL-37组均加入适宜浓度rhIL-6，IL-37组加入适宜浓度rhIL-37，培养24h后，IL-6+IL-37组加入适宜浓度IL-37继续培养24h，采用TranswellTM实验和划痕愈合实验分别检测各组细胞侵袭和迁移能力，RT-PCR法检测各组细胞中信号转导子与转录激活子3（STAT3）、E-钙粘蛋白（E-cadherin）、N-钙粘蛋白（N-cadherin）和波形蛋白（Vimenin）mRNA表达变化，Western blot检测各组细胞中STAT3、磷酸化转导子与转录激活子3Y705（STAT3Y705）、E-cadherin、N-cadherin和Vimenin蛋白表达变化。 结果：与健康对照组比较，NSCLC组血浆中IL-37表达水平明显降低（P＜0.05），且IL-37表达降低与肿瘤TNM分期有关（P＜0.05），与患者年龄、性别、吸烟史及肿瘤病理类型无关（P＞0.05）；TranswellTM实验和细胞划痕实验结果显示，与对照组相比（rhIL-37浓度为0ng/mL），rhIL-37浓度为100ng/mL和500ng/mL时A549细胞的侵袭和迁移能力明显受到抑制（P＜0.05）；与对照组相比（rhIL-6浓度为0ng/mL），rhIL-6浓度为50ng/mL、100ng/mL及150ng/mL时，均可显著促进A549细胞的侵袭和迁移（P＜0.05），筛选出100ng/mL和50ng/mL分别作为IL-37和IL-6的适宜刺激浓度；在对照组、IL-6组、IL-37组及IL-6+IL-37组四组实验中，TranswellTM实验和细胞划痕实验结果显示，与IL-6组相比，IL-6+IL-37组A549细胞迁移和侵袭能力明显抑制（P＜0.05），IL-37具有抑制IL-6对A549细胞的促迁移和侵袭作用；RT-PCR结果表明，rhIL-6处理A549细胞上调Vimentin和N-cadherin mRNA水平表达， 下调STAT3和E-cadherin mRNA表达，加入rhIL-37后显著降低rhIL-6诱导A549细胞Vimentin和N-cadherin mRNA的表达水平，提高STAT3和E-cadherin mRNA的表达水平（P＜0.05）；Western blot结果表明，rhIL-6处理A549细胞上调pSTAT3Y705、Vimentin和N-cadherin蛋白表达，下调STAT3和E-cadherin蛋白表达，rhIL-37可逆转IL-6引起的蛋白表达变化，抑制IL-6对STAT3的激活作用和诱导上皮-间质转化（EMT）作用（P＜0.05）。 结论：本研究证实IL-37具有抑制NSCLC侵袭转移的能力，其分子机制可能与调控IL-6/STAT3信号通路诱导的EMT有关。IL-37在NSCLC进展中分子机制的研究可能为临床NSCLC的治疗策略的制定提供新的思路和治疗靶点。

目录

第一个书签之前

学术硕士学位论文

Abstract