中草药CD活性成分HY-1的体外抗癌活性研究

摘要

该论文主要研究了中草药活性单体HY-1的体外抗癌作用,并对其作用机制进行了初步的探讨.首先应用SRB法检测了HY-1对人慢性骨髓性白血病细胞K562、人大肠癌细胞HCT-15、人卵巢癌细胞A2780、人纤维肉瘤细胞HT1080多种人癌细胞体外增殖的抑制作用.接着从凋亡细胞的生化特征出发,应用琼脂糖凝胶电泳法检测不同浓度的HY-1对肿瘤细胞DNA降解的影响,结果显示两种细胞系皆呈现典型的DNA梯状条带,这就从生化方面证明了HY-1确实具有诱导肿瘤细胞凋亡的活性.进一步应用AnnexinV-FITC/PI双染法检测HY-1对肿瘤细胞K562膜表面磷脂酰丝氨酸(PS)分布的影响,结果表明外翻的PS含量随着HY-1作用时间的延长而不断增加,从而进一步肯定了HY-1以时间依赖方式诱导肿瘤细胞K562的凋亡.基于线粒体在细胞凋亡机制探讨中的重要性,应用Rh123染色法检测不同作用浓度及不同作用时间的HY-1对K562细胞线粒体跨膜电位(△ψm)的影响.最后应用Western-blot法,从凋亡相关蛋白变化的角度探讨了HY-1诱导肿瘤细胞K562凋亡的机制.综上所述,HY-1能以诱导细胞凋亡的方式抑制体外肿瘤细胞的增殖.且该论文研究结果首次表明HY-1能够以剂量、时间依赖方式,通过经典的线粒体激活途径诱导K562细胞发生凋亡.

目录

缩略词表

第一节序言

第二节细胞培养

第三节SRB法检测HY-1对多种人癌细胞的体外活性

第四节PI单染法检测HY-1对细胞周期分布的影响

第五节琼脂糖凝胶电泳法检测HY-1对DNA降解的影响

第六节AnnexinV-FITC/PI双染法检测HY-1对PS外翻的影响

第七节Rh123染色法检测HY-1对线粒体跨膜电位的影响

第八节Western-blot法分析HY-1诱导肿瘤细胞凋亡的机制

结论

参考文献

主要研究业绩

致谢