几种手性药物的对映体分离方法与药物动力学研究

摘要

手性药物的对映体分离已成为当今科学研究的热点。许多药物的两个对映体具有不同的药动学和药效学性质，药理作用也有显著差异，因此建立快速、准确、高效的手性药物拆分方法对新药开发、监测对映体立体选择性、对映体生理活性等研究都具有重要的意义。本文采用高效液相色谱手性流动相添加剂法分离了佐匹克隆和奥昔布宁两种手性药物的对映体；手性固定相法分离了硫普罗宁、联苯苄唑、佐匹克隆和奥司他韦四种手性药物的对映体；并建立了艾司佐匹克隆中左旋杂质的检查方法；对盐酸氧氟沙星在大鼠体内的立体选择性药物动力学及体内构型转化进行了研究。 1.佐匹克隆和奥昔布宁的对映体分离方法研究建立了使用β-环糊精为手性流动相添加剂的高效液相色谱法拆分佐匹克隆对映体、使用羟丙基-β-环糊精为手性流动相添加剂的高效液相色谱法拆分奥昔布宁对映体的方法，并分别考察了手性添加剂、有机改性剂、缓冲盐的种类和浓度以及流动相的pH值和流速及柱温等因素对对映体分离的影响，优化了色谱分离条件，并对分离机理进行了初步探讨。 2.硫普罗宁、联苯苄唑、佐匹克隆和奥司他韦的对映体分离方法研究采用高效液相色谱法、使用直链淀粉手性固定相(Chiralpak AD-H手性柱)在正相洗脱方式下对硫普罗宁、联苯苄唑和佐匹克隆三种手性药物进行对映体分离，使用纤维素手性固定相(Sumichiral OA-2500s手性柱)在正相洗脱方式下对奥司他韦对映体进行分离，分别考察了流动相中有机改性剂的种类和浓度、酸碱浓度、柱温、流速等因素对对映体分离的影响，优化了分离条件，并对分离机理进行了初步探讨。在优化的色谱条件下，四种手性药物的对映体均得到了完全分离。方法简单、快速、重现性好。 3.艾司佐匹克隆原料药中左旋杂质的检查方法研究右旋佐匹克隆又称艾司佐匹克隆，与其消旋体对比，药效强，不良反应少，目前正在作为一种新药进行临床研究。对于艾司佐匹克隆原料药及其制剂，左旋体为杂质需控制其含量。本文利用Chiralpak AD-H手性柱分离消旋体佐匹克隆，在此基础上，建立了艾司佐匹克隆原料药中左旋杂质的检查方法，该方法灵敏度高，重现性好，可用于艾司佐匹克隆原料药和制剂中左旋杂质的限量检查。 4.盐酸氧氟沙星在大鼠体内的立体选择性药物动力学及体内构型转化的研究建立了简便的手性配体交换色谱法拆分盐酸氧氟沙星对映体，对盐酸氧氟沙星在大鼠体内的立体选择性药物动力学及手性转化进行了初步研究。实验结果表明给予大鼠盐酸氧氟沙星消旋体后，血浆中右旋氧氟沙星的浓度始终高于其左旋体，右旋体与左旋体的Cmax比值为1.3，AUC0-t比值为1.7，配对student's t-检验结果表明，均具有显著性差异(P<0.05)，说明盐酸氧氟沙星对映体在大鼠体内的药物动力学具有立体选择性。通过检测给予大鼠盐酸左氧氟沙星后的血药浓度，考察盐酸左氧氟沙星在大鼠体内代谢过程中的构型转化，实验结果显示在血浆中并没有检测到其右旋体，证明左氧氟沙星在大鼠体内代谢过程中不发生构型转化。

目录

声明

摘要

第一章前言

1.1手性药物的研究概况

1.1.1手性与手性药物

1.1.2手性药物的生物活性研究

1.1.3手性药物的立体选择性药物动力学

1.1.4手性药物立体选择性研究的意义

1.2手性化合物的色谱分离方法

1.2.1手性衍生化法

1.2.2手性固定相法

1.2.3手性流动相添加剂法

1.3本论文的研究思路

第二章手性流动相添加剂法分离两种手性药物的对映体

2.1仪器与试剂

2.2溶液的制备

2.3佐匹克隆的对映体分离方法研究

2.3.1色谱条件

2.3.2流动相中盐的种类及浓度对分离的影响

2.3.3流动相中β-环糊精的浓度对分离的影响

2.3.4流动相中有机改性剂的种类及浓度对分离的影响

2.3.5流动相pH值对分离的影响

2.3.6柱温对分离的影响

2.3.7流速对分离的影响

2.3.8方法的重复性及检测限

2.4奥昔布宁的对映体分离方法研究

2.4.1色谱条件

2.4.2手性添加剂的选择

2.4.3 HP-β-CD浓度对分离的影响

2.4.4有机改性剂的种类及浓度对分离的影响

2.4.5流动相中缓冲盐的种类及浓度对分离的影响

2.4.6流动相pH值对分离的影响

2.4.7柱温对分离的影响

2.4.8流速对分离的影响

2.4.9方法的重复性及检测限

2.5小结

第三章手性固定相法分离四种手性药物的对映体

3.1仪器与试剂

3.2溶液的制备

3.3直链淀粉手性柱分离三种手性药物的对映体

3.3.1硫普罗宁的对映体分离方法研究

3.3.2联苯苄唑的对映体分离方法研究

3.3.3佐匹克隆的对映体分离方法研究

3.4纤维素类手性固定相分离奥司他韦对映体的方法研究

3.5讨论

第四章艾司佐匹克隆原料药中左旋杂质的检查方法研究

4.1仪器与试剂

4.2溶液的制备

4.3方法与结果

4.3.1色谱条件

4.3.2专属性试验

4.3.3灵敏度试验

4.3.4标准曲线和线性范围

4.3.5精密度与重复性试验

4.3.6回收率试验

4.3.7溶液稳定性试验

4.3.8测定方法及结果

4.4讨论

第五章盐酸氧氟沙星在大鼠体内的立体选择性药物动力学及体内构型转化的研究

5.1仪器与试剂

5.2溶液的制备

5.3实验动物

5.4血浆样品分析方法

5.5浆中盐酸氧氟沙星分析方法的确证

5.5.1方法的专属性

5.5.2标准曲线和线性范围

5.5.3精密度和准确度

5.5.4提取回收率和稳定性

5.6药物动力学研究

5.6.1 血浆样品的采集与处理

5.6.2 血浆样品的测定

5.6.3实验结果

5.7讨论

5.7.1色谱条件的选择

5.7.2流动相条件的选择

5.7.3 血浆样品的预处理

5.7.4内标的选择

5.7.5盐酸氧氟沙星在大鼠体内的立体选择性药物动力学及体内构型转化的研究

第六章结论

参考文献

硕士在读期间发表论文情况

致谢