羊肌细胞生成素（MyoG）基因的克隆及其多态性的分析

摘要

本研究从影响肉羊产肉性能的肌细胞生成素(MyoG)基因出发，利用GenBank中其它物种的序列信息，通过序列比对、分析和PCR-SSCP方法，对尚未报道的羊MyoG基因部分序列进行扩增、克隆、测序及PCR-SSCP多态性分析。方法：1、在GenBank中查找羊MyoGmRNA序列和猪、人、鼠的MyoG基因序列，运用DNAStar软件对这些序列进行同源性分析。依据同源性较高外显子区域设计引物。首先提取羊血液基因组DNA，采用PCR技术扩增3段羊MyoG的部分序列，将这些片段重组到PMD18-T载体中，双酶切和PCR鉴定后测序，拼接后获得1884bp的羊MyoG基因的部分序列。2、通过已获得的MyoG基因在其外显子处设计两对引物，同样采用PCR技术扩增其序列并进行PCR-SSCP多态性分析。研究结果表明：①首次成功地克隆了羊的肌细胞生成素基因的全部内含子。第一内含子为766bp，第二内含子为587bp。②通过序列分析，发现羊的已知MyoG基因序列核苷酸组成富含GC(58.6％)，且外显子GC含量为65.4％明显高于内含子，并与其它物种包括牛、猪、人和鼠的外显子序列同源比对，发现它们的同源性分别为99.2％、91.3％、89.4％和87.5％，表现出高度保守性。同时进行了序列的核苷酸其它分析，旨在为研究羊MyoG基因结构与调控以及该基因在羊生长发育过程中的作用机制提供基础资料。③经PCR-SSCP分析，发现第一外显子扩增片段对应的基因编码区存在多态性，第二外显子扩增片段对应的基因编码区不存在多态性。已知MyoG基因的第一外显子的305处由T→C的突变，导致等位基因A变为等位基因B。此序列已登录GenBank，登录号：DQ453548。

目录

文摘

英文文摘

1引言

2实验材料与方法

3结果与分析

4讨论

5结论

致谢

参考文献

附录

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