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羊草与灰色赖草杂种F育性恢复的研究

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1 引言

1.1远缘杂交育种的意义

1.2赖草属远缘杂交研究概况

1.3克服远缘杂种不育的方法

1.3.1回交法

1.3.2染色体加倍法

1.3.3杂种胚的离体培养

1.3.4克服杂种不育的其它方法

1.4远缘杂种F1育性恢复的鉴定方法

1.4.1形态学鉴定

1.4.2细胞遗传学鉴定

1.4.3同工酶鉴定

1.5本试验的研究内容、目的和意义

2研究一 实体人工加倍克服羊草与灰色赖草杂种F1不育

2.1材料和方法

2.1.1材料

2.1.2研究方法

2.2结果与分析

2.2.1化学诱导剂浸泡法处理后分蘖芽和根茎芽的表现

2.2.2化学诱导剂包埋法处理后分蘖苗的表现

2.2.3化学诱导剂包埋法处理后分蘖苗植株表观特征

2.3讨论与小结

2.3.1化学诱导剂实体诱导染色体加倍方法的比较

2.3.2化学诱导剂人工实体包埋法诱导染色体加倍条件筛选

2.3.3不同诱变剂的比较

3研究二 离体培养加倍克服羊草与灰色赖草杂种F1不育

3.1材料和方法

3.1.1材料

3.1.2仪器

3.1.3研究方法

3.2结果与分析

3.2.1不同加倍途径对愈伤组织生长和分化的影响

3.2.2不同诱变剂对愈伤组织生长和分化的影响

3.2.3不同消毒灭菌方式对氟乐灵处理愈伤组织生长和分化的影响

3.2.4诱变剂处理愈伤组织后的加倍效果

3.2.5再生小植株经加倍处理后的生长状况

3.3讨论与小结

3.3.1化学加倍剂诱导愈伤组织分化效果

3.3.2氟乐灵在不同的灭菌方法下诱导愈伤组织分化的效果

3.3.3诱变剂处理愈伤组织后的加倍效果

3.3.4不同诱变剂的比较

3.3.5实体与离体染色体加倍效果比较

4研究三 回交法克服羊草与灰色赖草杂种F1不育

4.1材料和方法

4.1.1材料

4.1.2研究方法

4.2结果与分析

4.3讨论与小结

5 结论

致 谢

参考文献

图版说明

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摘要

羊草与灰色赖草杂种F1羊草和灰色赖草远缘杂交种,其具有亲本的优良品质,但在开放授粉条件下完全不育,目前依靠无性繁殖的方式将杂种植株用保留下来。本研究以羊草与灰色赖草杂种F1为试验材料,通过杂种F1回交试验;秋水仙素和氟乐灵处理分蘖芽、根茎芽的染色体加倍试验;秋水仙素和氟乐灵处理愈伤组织的染色体加倍试验,以探究恢复杂种F1育性的有效方法。主要结果如下: (1)用亲本羊草、灰色赖草回交羊草与灰色赖草杂种F1,杂种F1育性较难恢复。 (2)化学诱导剂浸泡法0.12%秋水仙素处理24h、36h、12+12h、12+24h;0.16%秋水仙素处理12h、24h、36h、12+12h、12+24h;0.20%秋水仙素处理12h、24h、36h的分蘖芽和根茎芽移栽到花盆中10天左右观察到芽中下部有膨大肿胀现象。经氟乐灵处理后的分蘖芽和根茎芽无芽膨大现象。 (3)秋水仙素包埋法诱导羊草与灰色赖草杂种F1分蘖苗染色体加倍的适宜浓度为0.20%、适宜处理次数为3次。氟乐灵包埋法浓度在200μM时,处理杂种F14次后,出现变异植株,变异率为2%。经加倍处理后的分蘖苗第一片叶子生长受到抑制。处理两个月生长稳定后,染色体加倍植株叶长大于羊草与灰色赖草杂种F1。 (4)相同处理时间下随着化学诱导剂浓度的增加,愈伤组织分化绿芽率均有所下降。相同秋水仙素浓度下随着处理时间的增加,愈伤组织分化绿芽率也有所下降。 (5)本试验诱导杂种F1愈伤组织染色体数增加的适宜处理条件为:秋水仙素0.01%浓度下处理27h,0.05%浓度下处理18h;氟乐灵200μM浓度处理28h,500pM浓度处理28h。

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